Внимание! Статья адресована врачам-специалистам

Abasova S.A.

Azerbaijan Medical University, Baku

The effectiveness of herbal medicine against the background

of phenacetin model of drug-induced hepatitis

Резюме. Эксперименты ставились на белых лабораторных беспородных крысах, у которых моделировали лекарственный фенацетиновый гепатит. В качестве лечения в плацебо-контролируемых экспериментах животные в различных группах в качестве лечения получали альфа-токоферола ацетат, урсодеоксихолевую кислоту, 10% настой фитокомплекса AZHEPOFIT, 10% настой фитокомплекса AZHEPOFIT совместно с урсодеоксихолевой кислотой. На фоне модели фенацетинового гепатита применение фитокомплекса совместно с урсодеоксихолевой кислотой доводило коэффициент Ритиса до 1,49±0,05, максимально приближаясь к интактным значениям, одновременно снижалась выраженность перекисного окисления липидов и повышалась активность системы антиоксидантной системы организма.

Ключевые слова: фенацетиновый лекарственный гепатит, альфа-токоферола ацетат, урсодеоксихолевая кислота, фитокомплекс AZHEPOFIT, коэффициент Ритиса.

Медицинские новости. – 2022. – №9. – С. 58–61.

Summary. The experiments were carried out on white laboratory outbred ratsin which drug-induced hepatitis was modeled. As treatment in placebo-controlled experiments, animals in different groups received a-tocopherol acetate, ursodeoxycholic acid, 10% AZHEPOFIT phytocomplex infusion, 10% AZHEPOFIT phytocomplex infusion together with ursodeoxycholic acid as treatment. Against the background of the phenacetin hepatitis model, the use of the phytocomplex together with ursodeoxycholic acid brought the Ritis coefficient to 1.49±0.05, approaching intact values as much as possible, while the severity of LPO decreased and increased the activity of the body’s antioxidant system.

Keywords: phenacetin drug-induced hepatitis, a-tocopherol acetate, ursodeoxycholic acid, AZHEPOFIT phytocomplex, Ritis coefficient.

Meditsinskie novosti. – 2022. – N9. – P. 58–61.

Номенклатура лекарственных препаратов, оказывающих как побочное действие гепатотоксический эффект, исчисляет более 1000 представителей различных фармакологических групп. Наиболее часто гепатопатии вызывают цитостатики, антибиотики, нестероидные противовоспалительные средства и др. [1]. Зачастую эти вещества могут оказывать на печень (орган, где происходит метаболизм лекарственных средств) непосредственное дозозависимое токсическое действие и/или независимо от дозы по идиосинкратическому механизму развития повреждать гепатоциты. Клиническое проявление лекарственных гепатопатий сильно вариабельно: от бессимптомного до фульминантного течения [2].

Гепатопротекторы, широко применяемые в лечении лекарственных гепатитов, не всегда дают ожидаемый эффект [3]. Поэтому изучение механизмов патологического поражения печени с учетом роли оксидативного стресса, холестаза и других факторов на состояние гепатоцитов и возможность их регенерации и разработка эффективных схем лечения остаются актуальной задачей медицинской науки [4, 5].

Цель исследования – на модели фенацетинового гепатита изучить эффективность различных схем лечения, включающих антиоксиданты, урсодеоксихолевую кислоту, фитокомплекс.

Материалы и методы

Эксперименты ставили на 70 белых лабораторных беспородных крысах, разделенных на 2 группы. В 1-й группе были интактные животные (10 крыс), во 2-й – животные, у которых моделировали фенацетиновый гепатит. Животные 2-й группы разделены на 6 подгрупп (п/г) по 10 крыс в каждой: 1-я п/г – модель, 2-я п/г – контроль, где животные получали плацебо, 3-я п/г – в качестве лечения животные получали альфа-токоферола ацетат в дозе 50 мг/100 г веса, 4-я п/г – урсодеоксихолевую кислоту в дозе 25 мг/100 г веса, 5-я п/г – 10% настой фитокомплекса AZHEPOFIT в дозе 1 мл/100 г веса, 6-я п/г – 10% настой фитокомплекса AZHEPOFIT в дозе 1 мл/100 г веса совместно с урсодеоксихолевой кислотой в дозе 25 мг/100 г веса. Животные получали лечение в течение 2 недель 2 раза в день.

Все животные, используемые в экспериментах как в основных, так и контрольных группах, содержались в одинаковых условиях ухода и пищевого режима. Критерии включения в эксперимент: половозрелый возраст, вес в пределах 170–200 г, шерстяной покров без повреждений. Критерии исключения из эксперимента: малый вес, агрессивность. Из эксперимента также исключались животные, у которых при моделировании не повышались биохимические маркеры поражения печени.

Все эксперименты на животных проводились согласно Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных и других научных целях (Страсбург, 1986). Проведение эксперимента разрешено решением Этического комитета при Азербайджанском медицинском университете за №10 от 16.10.2019.

Моделирование фенацетинового гепатита проводили следующим образом: крысам в течение 7 дней ежедневно вводили внутрь суспензию парацетамола в воде в дозе 2500 мг/кг и 1 мл 40% спирта. С этой целью использовали препарат «Парацетамол софарма 500 мг» производства SOPHARMA, Болгария. Как известно, парацетамол в ходе метаболизма в организме превращается в фенацетин, который в высоких дозах оказывает гепатотоксическое действие.

Этиловый спирт включался в рацион питания для усиления токсического действия парацетамола. При этом результаты гистологических исследований печени животных доказывает развитие изменений в печеночной ткани, соответствующей развитию умеренного токсического гепатита по цитолитическому типу лекарственного гепатита. Развитие лекарственного гепатита подтверждалось показателями маркеров поражения печени, которые повышались более чем в 1,5–2 раза по сравнению с интактными значениями.

После того как лабораторные данные подтверждали развитие гепатита животным назначали курс лечения: альфа-токоферол (лечение 1), урсодеоксихолевая кислота (лечение 2), фитокомплекс AZHEPOFIT (лечение 3), комбинированное применение – фитокомплекс AZHEPOFIT и урсодеоксихолевая кислота (лечение 4).

Кровь, забранная после забоя животных, подвергалась соответствующим биохимическим исследованиям, представленным ниже.

Таблица. Изменение содержания в крови ALT, ASТ, ?-GTP, LHDи ALP на фоне фенацетиной модели гепатита

В крови определяли активность ферментов: аланинаминотрасферазы (ALT), аспартатаминотрансферазы (AST), щелочной фосфатазы (ALP), гамма-глютамилтранспептидазы (гамма -GTP), лактатдегидрогеназы (LHD). Исследование проводили с использованием наборов реактивов производства «HUMAN» на микроанализаторе BIOSKREM MS 2000 (США). Содержание в крови продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ): гидроперекиси (HP), концентрацию диеновых конъюгатов (DK), малонового диальдегида (МDА), общий антиоксидантный статус (ОАС), активность каталазы (Kat) и супероксиддисмутазы (SOD) – определяли на микроанализаторе BIOSKREM MS 2000 (США) с использованием наборов реактивов производства «HUMAN».

Состав фитокомплекса AZHEPOFIT следующий: семена расторопши пятнистой – 2 ч., трава спорыша – 1 ч., трава зверобоя продырявленного – 1 ч., сельдерей пахучий – 1 ч., семена льна – 2 ч., корневище с корнями куркумы длинной – 1 ч. Исследования выявили, что фитокомплекс содержит биологически активные соединения из группы флавоноидов, алкалоидов, тритерпеновых эфиров, производных изохинолина. Токсико-фармакологические исследования выявили низкую токсичность (LD₅₀) настоя фитокомплекса.

Статистический анализ количественных данных проведен с применением непараметрических методов Уилкоксона, Манна – Уитни. Для статистической обработки были использованы программы MS Excel и S-PLUS.

Результаты и обсуждение

Полученные результаты исследований представлены в таблице, из которой видно, что при моделировании фенацетинового гепатита в сыворотке крови животных содержание ALT и AST повышалось в 2,8 и 1,5 раза,??-GTP, LDH, ALP – на 43,8%, 79,4%, 81,0% соответственно. Полученные данные подтверждают развитие гепатита у животных.

В контрольной п/г показатели изменялись незначительно, р>0,05.

Из таблицы видно, что у животных, получавших лечение 1 содержание ALT снижалось на 36,7% (р<0,001), AST – на 27,8% (р<0,001). Содержание гамма-GTP снизилось на 10,8% (р=0,028). LDH снизился на 6,9% (р=0,040), ALP – на 9,0% (р=0,196) (статистически недостоверно).

На фоне лечения 2 содержание ALT снизилось 13,9% (р=0,081), AST – на 6,1 (р=0,470). При этом статистической достоверностью обладало только снижение содержания в крови ALT. Но в целом результаты лечения в этой п/г имели менее выраженную положительную динамику, чем при лечении ?-токоферол ацетатом. Содержание ?-GTP в крови животных снизилось на 9,4% (р=0,002). LDH снизился на 6,3% (р=0,023), ALP – на 9,0% (р=0,196) (статистически недостоверно).

На фоне лечения 3 содержание ALT снижалось на 21,3% (р=0,012), AST – на 23,5% (р=0,006). Коэффициент Ритиса снизился на 2,2% и составлял 0,97±0,09, это изменение статистически не подтверждалось (р=0,623). Как видно из полученных результатов, равнозначное снижение обоих показателей практически не изменяло коэффициент Ритиса, что свидетельствует о том, что некротический процесс в печени продолжается, несмотря на значительное снижение содержания обоих ферментов.

Содержание  гамма -GTP в крови животных снизилось на 30,6% (р<0,001), LHD – на 37,3% (р<0,001), ALP – на 45,7% (р<0,001).

На фоне лечения 4 содержание ALT снижалось на 51,0% (р<0,001), AST – на 35,7% (р<0,001). Коэффициент Ритиса повышался на 30,5% (р=0,013) и составлял 1,29±0,07. При этом гамма-GTP снизился на 28,3% (р<0,001). LDH снизился на 45,2% (р<0,001), ALP – на 42,8% (р<0,001).

Оксидативный стресс и состояние системы антиоксидантной защиты организма оказывают значительное патогенетическое действие в развитии гепатитов неинфекционной этиологии [5]. В наших исследованиях в крови животных, у которых был смоделирован фенацетиновый лекарственный гепатит показатели ПОЛ – HP, МДА и ДК – повысились в 1,9, 1,6 и 1,9 раза соответственно. Показатели активности системы антиоксидантной защиты – ОАС и Kat – снизились на 36,9% и 33,1% соответственно, а SOD повысилась на 3,7% (р=0,650). На фоне проводимых схем лечения наблюдали следующие изменения.

На фоне лечения 1 содержание HP снижалось на 39,2% (р<0,001). Содержание МДА и ДК в плазме крови животных также снижалось на 18,4% (р<0,001) и на 27,7% (р<0,001) соответственно. При этом ОАС в крови повышалось на 44,6% (р=0,001). Активность Kat снизилась на 0,3% (р=0,880), SOD – на 2,6% (р=0,703). Изменение активности Kat и SOD статистически не подтверждается (р>0,05).

На фоне лечения 2 HP снижалось на 26,4% (р<0,001), МДА и ДК – на 18,4% (р<0,001) и 27,7% (р<0,001) соответственно. ОАС повышалось на 11,2% (р=0,064). Kat снизилась на 13,6% (р=0,1), а SOD – на 8,5% (р=0,109).

На фоне лечения 3 содержание HP снижалось на 38,9% (р<0,001), МДА и ДК – на 23,2% (р<0,001) и 28,1% (р<0,001) соответственно. ОАС в крови животных повышалось на 53,5% (р=0,001), Kat – на 23,4% (р=0,009), SOD – на 2,2% (р<0,731).

На фоне лечения 4 HP снижалось на 45,0% (р<0,001), МДА и ДК – на 26,7% (р<0,001) и 37,2% (р<0,001) соответственно. ОАС повышалось на 64,8% (р<0,001), Kat – на 20,8% (р=0,005), активность SOD – на 2,8% (р=0,467).

Анализ полученных результатов позволяет утверждать, что на фоне фенацетиновой модели лекарственного гепатита альфа-токоферол, являясь сильным антиоксидантом, значительно снижает выраженность ПОЛ, но при этом система антиоксидантной защиты организма не восстанавливается, хотя наблюдается статистически не подтверждаемое незначительное повышение ОАС. Снижение активности ферментов ALT, AST, гамма-GTP и повышение коэффициента Ритиса на 11,2% (р=0,006) до значений 1,10 при норме 1,88±0,7, в группе модели – 0,99±0,07, свидетельствует об улучшении функционального состояния печени и уменьшении поражения гепатоцитов [6]. Улучшение связано с прямым антиоксидантным действием альфа-токоферола, снижением уровня ПОЛ и восстановлением фосфолипидных мембран клеток печени [7]. Данный факт имеет теоретическое значение в объяснении механизма патогенеза развития фенацетинового гепатита и разработки методики лечения. Разрушительная роль ПОЛ в развитии цитолитического типа (фенацетинового) лекарственного гепатита подтверждается и тем, что урсодеоксихолевая кислота не показала выраженного положительного эффекта на течение патологии. Коэффициент Ритиса при этом составлял 1,06, повышаясь на 6,8% при р=0,058. На фоне лечения фитокомплексом наблюдается положительная динамика изменений всех исследуемых показателей. При этом коэффициент Ритиса составлял 0,97±0,09, а значение этого показателя <1 говорит о продолжающихся некротических процессах в печени. Известно, что биологически активные соединения растений в составе фитокомплекса оказывают антиоксидантное, противовоспалительное, желчегонное, регенерирующее и репаративное действие на гепатоциты, общее системное действие на организм и обусловливает значительный положительный эффект, который максимально выявлялся при комбинированном лечении с урсодеоксихолевой кислотой вследствие синергизма действующих фармакологически активных веществ фитокомплекса с урсодеоксихолевой кислотой. При этом все исследуемые показатели приближались к интактным значениям, а коэффициент Ритиса достигал значений, равных 1,29±0,07.

Таким образом, на фоне фенацетинового гепатита применение фитокомплекса AZHEPOFIT в комбинации с урсодеоксихолевой кислотой оказывает наиболее благоприятное действие, ингибирует процессы ПОЛ и нормализует функциональное состояние печени, что позволят рекомендовать подобную схему лечения лекарственного гепатита для дальнейших изучений с целью внедрения в перспективе в медицинскую практику.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Rao A., Rule Jody A., Hameed B. // Am. J. Gastroenterol. – 2022. – Vol.117, N4. – P.617–626.

2. Mengoli M., Parmeggiani D., Mengoli M.C., et al. // Recenti Prog. Med. – 2011. – Vol.102, N6. – P.253–260.

3. Hepatol J. // Eur. Assoc. Study Liver. – 2019. – Vol.70, N6. – P.1222–1261.

4. Jawad Ahmad, Joseph A. Odin, Paul H., et al. // Drug Alcohol Dependence. – 2021. – Vol.218, N1. – P.108426.

5. Hillman L., Gottfried M., Whitsett M., et al. // Am. J. Gastroenterol. – 2016. – Vol.111, N7. – P.958–965.

6. Baoli Wang, Lunyang Hu, Zhaofan Xia // Burns. – 2022. – Vol.48, Iss.4. – P.872–879. https://doi.org/10.1016/j.burns.2021.08.006

7. Полухова Ш.М., Мусаева Э.М., Гусейнова Г.А., Гасымова С.В., Джафарова Р.Э. // Вестн. Витебского гос. мед. ун-та. – 2018. – Т.17, №4. – С.29–36.

Медицинские новости. – 2022. – №9. – С. 58-61.

Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.