Внимание! Статья адресована врачам-специалистам

Shikhamedova A.J., Sultanova N.H.

Azerbaijan Medical University, Baku

Caracteristics of intestinal microbiota in children, sufferin from acute urticaruia

Резюме. Микробиота желудочно-кишечного тракта представляет собой сложнейшую микробную экосистему и занимает лидирующее положение среди микробиоты различных биотопов человека. Целью исследования стала оценка состояния микробиоты кишечника у детей с острой крапивницей методом полимеразной цепной реакции с детекцией результатов в режиме реального времени (ПЦР-РВ). В исследовании приняли участие 80 детей обоего пола, находящихся под наблюдением с диагнозом «Острая крапивница» (основная группа). Контрольную группу составили 20 практически здоровых детей. Проведено исследование микробиоты кишечника методом ПЦР с автоматической регистрацией результатов в режиме реального времени. Межгрупповые показатели сравнивали применением критерия ?^{2 Пирсона с дополнительным уточнением результатов критерием U Уилкоксона. Внутригрупповые сравнения проводили критериями W Вилкоксона и Z-знаков. Вычисление проводили в статистическом пакете SPSS-26. Выявленные изменения в микробиоте кишечника предполагают назначение таким больным пробиотических препаратов для коррекции нарушений кишечной микрофлоры.}

Ключевые слова: острая крапивница, дети, микробиота кишечника, пробиотики.

Медицинскиеновости. – 2022. – №9. – С. 49–51.

Summary. The microbiota of the gastrointestinal tract is the most complex microbial ecosystem and occupies a leading position among the microbiota of various human biotopes. To assess the state of the intestinal microbiota in children with acute urticaria using a polymerase chain reaction with real-time detection of results (RT-PCR). The study involved 80 children of both sexes under observation with a diagnosis of «Acute urticaria» (main group). The control group consisted of 20 practically healthy children. A study of the intestinal microbiota was carried out by PCR with automatic registration of results in real time. Intergroup indicators were compared using the ?² Pearson test, with additional refinement of the results by the U Wilcoxon test. Intragroup comparisons were performed using W Wilcoxon test and Z-signs. The calculation was carried out in the statistical package SPSS-26. The revealed changes in the intestinal microbiota suggest the appointment of probiotic preparations for such patients to correct violations of the intestinal microflora.

Keywords: acute urticaria, children, intestinal microbiota, probiotics.

Meditsinskie novosti. – 2022. – N9. – P. 49–51.

Микробиота желудочно-кишечного тракта представляет собой сложнейшую микробную экосистему и занимает лидирующее положение среди микробиоты различных биотопов человека. Формирование микробиоты начинается с момента рождения и зависит от множества факторов, таких как срок и способ рождения, способ вскармливания ребенка и т.д. [1]. Микробиота толстого кишечника является самой многочисленной и представлена 17 семействами, 45 родами и более чем 1000 видов бактерий [2, 3]. Развитие молекулярно-генетических технологий, которые позволяют идентифицировать многочисленные виды бактерий, не поддающихся культивированию, послужили пусковым фактором к углубленному изучению микробиоты человека. 

Происходящее во всем мире снижение биоразнообразия, изменения в социальном поведении приводят к нарушению микробной экологии человека. Изменения микробиоты кишечника однозначно влияют на здоровье человека. В литературе широко обсуждаются вопросы влияния микрофлоры кишечника на течение и развитие самых различных заболеваний. Возможными клиническими последствиями дисбиоза кишечника являются различная патология желудочно-кишечного тракта, кожные заболевания, утяжеление течения иммунозависимой патологии [4, 5].

Кишечная микробиота, помимо участия в пищеварении, выполняет иммуномодулирующую функцию, а также задействована в развитии и функционировании различных систем органов. Учитывая влияние кишечной микробиоты на иммунные функции, в настоящее время активно обсуждается ее роль в патогенезе аллергической патологии [6–8].

Цель исследования – оценка микробиоты кишечника у детей с острой крапивницей методом полимеразной цепной реакции с детекцией результатов в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Материалы и методы

В исследовании приняли участие 80 детей обоего пола, находящиеся под наблюдением с диагнозом «Острая крапивница» (основная группа). Контрольную группу составили 20 практически здоровых детей. Средний возраст обследуемых – 7,5±0,4 года. Диагноз был выставлен на основании анамнестических данных и клинических симптомов заболевания в соответствии с Международной статистической классификацией болезней 10-го пересмотра (МКБ-10). Общеклинические методы исследования включали анализ анамнестических данных, объективный осмотр ребенка с определением степени тяжести заболевания по T. Zuberbier [9].

Основными критериями включения пациентов в исследование явились возраст детей от 0 до 16 лет, наличие эпизода крапивницы длительностью менее 6 недель, информированные согласия от родителей. Критериями исключения были следующие: возраст пациентов старше 16 лет, отсутствие подтвержденного диагноза «Острая крапивница», отсутствие согласия родителей на обследование и лечение детей.

При изучении микробиоты толстого кишечника больных острой крапивницей частоту обнаружения выделенных микроорганизмов сравнивали с аналогичными показателями детей контрольной группы. Всем детям выполнено исследование образцов фекалий с целью определения просветной микробиоты толстой кишки методом ПЦР-РВ. Состав микробиоты кишечника пациентов определяли в образцах фекалий, которые собирались в одноразовые пластиковые стерильные контейнеры. Биологический материал помещали в пробирку типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл, содержащую транспортную среду для ПЦР-исследований, и маркировали. ПЦР-диагностика исследуемых образцов проводилась с использованием детектирующего амплификатора FX-96, обеспечивающего проведение ПЦР с автоматической регистрацией результатов в режиме реального времени. Все этапы ПЦР-исследования выполнены согласно инструкции производителя тестов (QIAGEN, Германия).

В течение 2 месяцев до сбора образцов дети не принимали антибиотики, пробиотики или пребиотики, поскольку все эти факторы могут оказывать влияние на микробиоту кишечника.

Межгрупповые показатели сравнивали применением критерия ?² Пирсона (Pearson Chi-Square – р?²) с дополнительным уточнением результатов критерием U Уилкоксона (U – Mann – Whitney – p_U). Внутригрупповые сравнения проводили критериями W Вилкоксона (Wilcoxon test – p_W) и Z-знаков (Sign test – p_z). Вычисление выполняли в статистическом пакете SPSS-26.

Результаты и обсуждение

Для оценки состояния дисбиоза толстой кишки 80 детям с острой крапивницей и 20 здоровым детям из группы контроля проводилось исследование микробиоты кишечника. Методом ПЦР-РВ в полученных материалах выделены микроорганизмы, относящиеся к домену Bacteria, четырем основным типам (Firmicutes, Bacteroidetes, Actinobacteria и Proteobacteria). Состав кишечной микробиоты в исследуемых группах представлен в таблице.

У детей с острой крапивницей главными бактериями фекального микробного сообщества были Bifidobacterium spp. – у 78 (97,5%) больных. Далее по численности встречались B. Fragilis – у 77 (96,3%), E. coli – у 71 (88,8%) больного. Наименьшее представительство имели C. difficile – у 6 (7,5%) детей. Снижение количества Lactobacillus spp., оцениваемое до 1+, отмечали у 38,8%, до 2+ – у 61,3% детей. Снижение общего количества бактерий до 1+ наблюдали у 46,3%, до 2+ – у 53,8% больных острой крапивницей. Отрицательный результат теста показали Bifidobacterium spp. – у 2 (2,5%), E. coli – у 9 (11,3%), B. fragilis – у 3 (3,8%), C. difficile – у 74 (92,5%) больных.

В контрольной группе микробный состав фекальных образцов был следующим: Bifidobacterium spp. встречались в 40,0% (n=8), E. coli – в 65,0% (n=13), B. fragilis – в 50,0% (n=10) наблюдений. В этой группе C. difficile не определялись. Снижение количества Lactobacillus spp. до 1+ отмечалось у 35,0%, до 2+ – у 65,0% здоровых детей. Снижение общего количества бактерий до 1+ наблюдалась в 30,0%, до 2+ – в 70,0% случаев (см. таблицу).

Таблица. Показатели кишечного микробиоценоза у обследованных детей

При сравнении частот встречаемости различных таксонов микроорганизмов в толстом кишечнике детей основной и контрольной групп выявлены достоверные отличия по трем микроорганизмам. Наиболее часто встречающийся тип бактерий в группе больных острой крапивницей представлен типом Actinobacteria, который объединяет грамположительные бактерии. У больных острой крапивницей по сравнению с группой контроля отмечено увеличение бактерий рода Bifidobacterium (р_U<0,001).

Следующий по распространенности тип бактерий микрофлоры кишечника представлен Bacteroidetes, который включает в себя грамотрицательные неспорообразующие строгие анаэробы, обладающие сахаролитической активностью. У детей с острой крапивницей по сравнению с контрольной группой выявлено увеличение доли бактерий рода Bacteroides (B. fragilis) (р_U<0,001).

В группе больных также отмечено статистически значимое увеличение в составе кишечной микробиоты доли бактерий, относящихся к типу Proteobacteria. Тип Proteobacteria объединяет большинство грамотрицательных микроорганизмов, относящихся к факультативным или облигатным анаэробам. У детей с острой крапивницей рост Proteobacteria происходит за счет рода Escherichia (E. сoli) (р_U=0,010). Для C. difficile (р_U=0,209) и Lactobacillus spp. (р_U=0,759) статистически достоверных различий не отмечалось.

У обследованных детей с острой крапивницей отмечается тенденция к снижению Lactobacillus spp. и повышению Bifidobacterium spp., в связи с чем этим пациентам могут быть рекомендованы пробиотики. В настоящее время для лечения дисбиоза кишечника применяется значительное количество пробиотических препаратов как моно-, так и поликомпонентных [10]. Как правило, для создания подобных препаратов используются различные штаммы бифидо- и лактобактерий. Одним из симбиотических препаратов, нормализующих кишечную микрофлору, является Пробиоксин Кидс (Novator Pharma, Великобритания).

Пробиотик был назначен 21 ребенку с изменениями кишечного микробиоценоза. Контрольный анализ после проведенной коррекции дисбиоза кишечника показал, что в микробном пейзаже пациентов отмечалось достоверное увеличение числа Lactobacillus spp. – у 11 (52,3%) (р_z=0,001) детей, снижение E. coli – у 20 (95,2%) (р_W<0,001), B. fragilis – у 14 (66,7%) (р_W<0,001) больных. Статистически значимые изменения в общем количество бактерий (р_z=1,000) также в количествах Bifidobacterium spp. (р_W=0,317) и C. difficile(р_W=0,317) не обнаружены.

Заключение

Таким образом, у пациентов с острой крапивницей в различной степени были выявлены изменения кишечного микробиоценоза. Установлены статистически значимые различия частот встречаемости микроорганизмов, верифицированных в толстом кишечнике детей основной и контрольной групп наблюдения. Выявленные изменения в микробиоте кишечника предполагают назначение таким больным пробиотических препаратов для коррекции нарушений кишечной микрофлоры.

Л И Т Е Р А Т у Р А

1. Юдина Ю.В., Корсунский А.А., Аминова А.И., Абдуллаева Г.Д., Продеус А.П. // Доказательная гастроэнтерология. – 2019. – Т.8, №4–5. – С.36–43.

2. Максимова О.В., Гервазиева В.Б., Зверев В.В. // Журнал микробиологии. – 2014. – №3. – С.49–60.

3. Elson C.O., Alexander K.L. // Dig Dis. – 2015. – Vol.33, N2. – P.131–136.

4. Кайбышева В.О., Жарова М.Е., Филимендикова К.Ю., Никонов Е.Л. // Доктор.Ру. – 2021. – Т.20, №4. – С.40–45.

5. Айтбаев К.А., Муркамилов И.Т., Фомин В.В., Кудайбергенова И.О., Юсупов Ф.А. // The Scientific Heritage. – 2021. – Vol.65. – P.41–47.

6. Аминова А.И., Гумбатова З.Ф., Ерюшова Т.Ю. // Смоленский мед. альманах. – 2020. – №2. – С.176–179.

7. Azad M.B., Konya T., Maughan H. // Allergy Asthma ClinImmunol. – 2013. – Vol.9, N1. – P.15.

8. Legatzki A., Rosler B., von Mutius E. // Curr. Allergy Asthma Rep. – 2014. – Vol.14, N10. – P.466.

9.Zuberbier T., Aberer W., Asero R., et al. // Allergy. – 2018. – Vol.73, N7. – P.1393–1414.

10. Силина Л.В., Чаплыгин А.В., Устинов М.В., Ласеев Д.И., Илюхина Е.В. // Клин. дерматология и венерология. – 2019. – Т.18, №6. – С.776–783.

Медицинские новости. – 2022. – №9. – С. 49-51.

Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.