Внимание! Статья адресована врачам-специалистам
Akhmedov U.B.
Andijan State Medical Institute, The Republic of Uzbekistan
Morphological parameters of individual legs
of the cerebellary worm after amputation of the hind limb
Резюме. У собак после ампутации задней конечности в динамике в коре дольки ската червя мозжечка, как и в других частях, на ранних этапах эксперимента развиваются дисциркуляторные и отечные процессы, образуя вакуоли разного размера в промежуточном веществе. К 30-му дню эксперимента было замечено, что эти деструктивные процессы начали угасать и уменьшаться, вместо этого начали развиваться изменения, характерные для компенсаторного и заместительного процесса. К 60-му и 90-му дням нейроны во всех слоях были гипертрофированы и подвергались гиперхромазии, фиброзные структуры в промежуточном веществе увеличивались, эозинофильно окрашивались, а в результате пролиферации глиальных клеток развился диффузный глиоз.
Ключевые слова: собака, мозжечок, дольки ската червячка, дисциркуляторные и деструктивные изменения.
Медицинские новости. – 2021. – №7. – С. 84–86.
Summary. In dogs, after amputation of the hind limb in dynamics in the cortex of the lobule of the clivus of the cerebellar vermis, as in other parts, at the early stages of the experiment, discirculatory and edematous processes develop, forming vacuoles of various sizes in the intermediate substance. By the 30th day of the experiment, it was noticed that these destructive processes began to fade and diminish, and instead began to develop changes characteristic of the compensatory and replacement process. By days 60 and 90, neurons in all layers were hypertrophied and underwent hyperchromasia, fibrous structures in the intermediate substance increased, eosinophilically stained, and diffuse gliosis developed as a result of the proliferation of glial cells.
Keywords: dog, cerebellum, segments of the clivus, discirculatory and destructive changes.
Meditsinskie novosti. – 2021. – N7. – P. 84–86.
Одной из приоритетных проблем современной нейроморфологии является изучение закономерностей структурно-функционального строения центральной нервной системы под воздействием внешних и внутренних факторов, реализация ее интегративной активности и способности к равновесию [1–3]. В последние годы большинство ученых показали, что функция мозжечка, восстановления и замены, является важным при нарушении опорно-двигательного аппарата организма человека [4–7]. Исследования по этому поводу в основном были посвящены клиническим признакам, однако морфологические основы этих процессов не рассматривали.
Цель исследования – изучение морфологических и морфометрических изменений, характерных для процессов регенерации и замещения в дольках ската, листа, язычка (declive, folium, uvila) червя мозжечка у собак после ампутации задней конечности в динамике.
Материалы и методы
В качестве материала исследования были взяты 30 беспородных собак массой от 9 до 15 кг, которые были разделены на две группы: 5 животных для контроля (1-я группа), во 2-й группе проводили ампутации правой задней конечности на уровне среднего сустава трехмоментным методом Н.И. Пирогова. За 4–6 дней до начала эксперимента наблюдали за поведением собак и их жизнедеятельностью. Затем собакам делали операцию. За ампутированными животными наблюдали от 7 до 90 дней. Ампутация у всех животных была произведена методом Н.И. Пирогова в строгих асептических условиях трехэтапного нарезания мягких тканей конической формы путем закрытия тупой культи правой задней конечности. Для этого правую заднюю конечность собаки очистили от шерсти, а затем за полчаса до операции подкожно вводили 1% раствор гексенала или тиопентала натрия в зависимости от массы тела животного.
Пенициллин вводили внутримышечно по 500 000 ЕД в сутки в течение 5 дней после операции для профилактики возникновения гнойно-воспалительного процесса. Швы с раны сняли через 7–8 дней. Заживление раны проходило первичным рубцеванием. Животных забивали путем обескровливания.
Результаты и обсуждение
Наблюдались наиболее сильные дисциркуляторные и деструктивные изменения под влиянием ампутационного повреждения в ганглионарном слое на 7-е сутки эксперимента на дольке листа червя мозжечка. В результате было обнаружено, что нейроны Пуркинье сжимались, уменьшались в размерах и имели гиперхромазию как в цитоплазме, так и в ядре. В то же время цитоплазма глиальных клеток этого слоя была вакуолизирована из-за сильного отека, часть которой разорвалась, а ядро подверглось кариопикнозу. В этот период зернистый и молекулярный слои коры головного мозга изменились сравнительно мало.
К 21-му дню эксперимента было замечено, что дисциркуляторные и отечные процессы в коре листа коры головного мозга распространяются от ганглионарного к молекулярному слою. Установлено, что отек сначала распространяется по дендритным волокнам, которые широко разветвлены в молекулярном слое ганглионарных клеток, а затем отек распространяется на интерстициальную фиброзную ткань этого слоя, вокруг корзинчатых и звездчатых клеток этого слоя. Обнаружено, что отек развивался в цитоплазме базальных клеток этого слоя, а вокруг звездчатых клеток отека нет, но волокна и окружающая фиброзная ткань набухли и вакуолизированы.
К 30-му дню эксперимента было замечено, что процесс отека в ганглионарном слое коры дольки листа червя мозжечка также распространился на зернистый слой. Когда зернистый слой просматривается на объективе-100 микроскопа, морфологические изменения клеточных и промежуточных структур под влиянием отечного процесса и отека можно увидеть более четко и дифференцированно. Отечный процесс в первую очередь разрушил, дефрагментировал и хаотично сместил промежуточные волокнистые структуры. В результате клетки этого слоя также разрушены и разрежены. Цитоплазма наиболее многочисленных зернистых клеток этого слоя отечна, ядро несколько увеличено, а гетерохроматин в нем разрежен, принимает форму мелких гранул гематоксилина. У некоторых клеток развился кариолиз. Звездчатые клетки этого слоя увеличились в размерах из-за набухания цитоплазмы и гипертрофии ядра. Их ядра больше и светлее по цвету, чем ядра зернистых клеток, некоторые из которых имеют форму бобов.
К 90-м суткам исследования произошло полное исчезновение отека и деструктивных изменений во всех слоях коры дольки листа червя мозжечка. К концу эксперимента было определено, что морфологические изменения, присущие процессам адаптации и замещения, охватили все слои. Наблюдается гипертрофия клеток Пуркинье, которые обогащаются белковыми веществами в цитоплазме, наблюдается темное окрашивание эозинофилов, гипертрофия ядра, пролиферация хроматина и появление ядрышка (рис. 1, 2). При окрашивании гистохимическим методом (методом Ниссля) наблюдается увеличение количества хроматофильного вещества в цитоплазме ганглионарных нейронов. Темное эозинофильное окрашивание цитоплазмы зернистых нейронов. Относительная гипертрофия как корзинчатых, так и звездчатых клеток молекулярного слоя, утолщение волокон и разрастание глиальных клеток в этих слоях являются морфологическими признаками процессов адаптации и замещения, характеризующимися компенсаторными процессами, инициированными в предыдущий период в гранулярном слое, слегка гипертрофированное ядро и темное окрашивание гематоксилином, а также темное эозинофильное окрашивание фиброзной ткани между нейронами.
В продолжение исследования, когда был проведен морфометрический расчет структурных единиц кортикального слоя дольки листа червя мозжечка, было обнаружено, что изменения начались с ганглионарного слоя, как было сказано в гистологическом исследовании. При этом толщина ганглионарного слоя составила 42,6 мкм в контрольной группе, увеличилась до 50,3 мкм на 21-й день исследования, снова уменьшилась на 30-й день и утолщена до 52,7 мкм на 90-й день. Причина этого утолщения была связана с гипертрофией как нейронов, так и глиальных клеток.
Число нейронов Пуркинье в этом слое составляло в среднем 9,6 на одном объективе в контрольной группе. На ранних этапах исследования количество нейронов Пуркинье резко уменьшилось из-за истончения из-за сильного отека и деструктивных изменений ткани мозга. С 30-го дня он снова начинает расти за счет уплотнения и к 90-му дню составляет в среднем 8,8. Существенные изменения наблюдаются и в диаметре нейронов Пуркинье. В контрольной группе средний диаметр этих нейронов составлял 38,6 мкм, который уменьшился до 30,2 мкм на ранних этапах исследования и увеличился до 49,6 мкм из-за сильной гипертрофии этих нейронов к 60-му и 90-му дням (табл. 1).
Таблица 1. Морфометрические показатели ганглионарного слоя коры дольки листа червя мозжечка собак после ампутации задней конечности в динамике
День эксперимента
|
Количество клеток на 40х объект
|
Толщина ганглионарного слоя, мкм
|
Широкий диаметр клеток Пуркинье, мкм
|
Маленький диаметр клеток Пуркинье, мкм
|
Диаметр ядра клеток Пуркинье, мкм
|
Ядерно-цитоплаз-матическое соотношение
|
Контроль
|
9,6±0,7
|
42,6±0,74
|
38,6±2,6
|
28,7±1,8
|
19,3±1,4
|
0,67
|
7-й
|
6,4±0,4
|
48,7±0,65*
|
32,5±1,8*
|
21,6±1,6
|
16,4±1,3*
|
0,75
|
21-й
|
3,8±0,5
|
50,3±0,57*
|
30,4±1,7*
|
22,8±1,4*
|
15,7±1,8
|
0,68
|
30-й
|
4,5±0,3
|
42,6±0,48
|
33,7±2,4
|
25,3±1,9
|
18,7±1,5
|
0,74
|
60-й
|
6,8±0,6
|
49,4±1,12**
|
46,7±2,8
|
30,5±2,5**
|
20,6±2,4
|
0,67
|
90-й
|
8,8±0,7
|
52,7±1,23**
|
49,6±3,23
|
37,6±2,7
|
22,5±2,2
|
0,59
|
Примечание: здесь и в таблице 2 * – достоверность показателя статистически значима по сравнению с таковым в группе контроля, р≤0,01, ** – р≤0,001.
Толщина молекулярного слоя дольки листа червя мозжечка в контрольной группе составляла 185,2 мкм. Толщина этого слоя резко увеличивается к 21-му дню эксперимента и составляет 196,7 мкм. В последующие периоды толщина молекулярного слоя незначительно уменьшается за счет снижения отека и деструктивных изменений ткани мозга, оставляя 182,6 мкм на 30-е сутки, а в последний день эксперимента из-за гипертрофии нейронов и увеличения промежуточного вещества, достигает до 192,7 мкм.
В соответствии с этими морфомет-рическими изменениями количество нейронов в этом слое составило 84 в контрольной группе, однако на ранних этапах эксперимента оно снова уменьшилось из-за процессов набухания и деструкции, а к 21-му дню упало до 70. В конце эксперимента плотность снова увеличилась и составила 82 (табл. 2). В молекулярном слое фактически присутствуют два нейрона, главным из которых является диаметр ядра звездного нейрона в контрольной группе, равный 9,5 мкм. На ранних этапах эксперимента нейроны сжимаются и уменьшаются в размерах под воздействием отека и деструктивных изменений ткани мозга. На 21-й день звездчатый нейрон не сокращается до 7,8 мкм, а базальный нейрон – до 5,6 мкм. Однако к 90-му дню эксперимента нейроны гипертрофируются и увеличиваются, звездчатый нейрон увеличивается до 10,5 мкм, базальный нейрон – до 8,6 мкм. При измерении диаметра ядер нейронов в зернистом слое было обнаружено, что в контрольной группе ядро гранулярного нейрона составляло 7,4±0,8 мкм, ядро звездчатого нейрона было немного крупнее (9,6±0,9 мкм), а ядро горизонтальных нейронов было 8,5±0,7 мкм.
Таблица 2. Морфометрические показатели зернистого слоя коры дольки листа червя мозжечка собак после ампутации задней конечности в динамике
День эксперимента
|
Толщина зернистого слоя, мкм
|
Количество клеток зернистого слоя, в одном объекте 40х
|
Диаметр ядра зернистых клеток, мкм
|
Диаметр ядра звездчатых клеток, мкм
|
Диаметр ядра горизонтальных клеток, мкм
|
Контроль
|
124,6±4,3
|
5754,8±14,6
|
7,4±0,8
|
9,6±0,9
|
8,5±0,7
|
7-й
|
134,6±4,2*
|
5257,6±12,8*
|
7,2±0,7*
|
8,5±0,6*
|
8,1±0,6*
|
21-й
|
144,4±5,7
|
4864,5±11,8
|
7,4±0,5
|
8,6±0,9
|
8,4±0,5
|
30-й
|
142,4±4,8**
|
5246,6±10,5**
|
7,2±0,5**
|
9,3±0,7**
|
8,7±0,4**
|
60-й
|
132,6±3,8
|
5518,4±9,12
|
8,3±0,4
|
10,5±0,5
|
8,4±0,5
|
90-й
|
126,4±3,6**
|
5422,6±9,5**
|
8,1±0,3**
|
12,6±0,4**
|
8,6±0,4**
|
На ранних этапах эксперимента ядра этих нейронов несколько сокращаются из-за развития отека в интерстициальной ткани, но к концу эксперимента из-за гипертрофии и гиперхромизации ядер их диаметр также увеличивается, 8,1±0,3, 12,6±0,4, 8,6±0,4 мкм соответственно для каждого нейрона. Следует обратить внимание на то, что ядро звездчатого нейрона увеличилось больше, чем у других.
Заключение
Раскрыт период возникновения морфологических и морфометрических изменений, характерных для процессов регенерации и замещения, развивающихся в дольках ската, листа и язычка червя мозжечка и сущность аспектов, характеризующих репаративную регенерацию.
Л И Т Е Р А Т У Р А
1. Алексеева О.С., Гилерович Е.Г., Кирик О.В., Коржевский Д.Э. // Морфология. – 2016. – №4. – C.40–43.
2. Казакова С.С. // Российский медико-биологический вестник им. академика И.П. Павлова. – 2009. – №2. – С.33–37.
3. Касимхожиев М.И., Касимходжаев И.К. // Морфология. – 2010. – Т.137, №4. – C.100–101.
4. Косимходжаев И.К., Улугбекова Г.Ж. // Ibn Sino – Avicenna. – 2005. – №1–2. – C.27.
5. Степаненко А.Ю. // Морфология. – 2009. – №4. – С.5–13.
6. Улугбекова Г.Ж. // Ibn Sino – Avicenna. – 2005. – №1–2. – C.63.
7. Улугбекова Г.Ж., Косимходжаев И.К., Маматалиева М.А., Косимов Г.З. // Бюллетень ассоциации врачей Узбекистана. – 2011. – №1. – C.76–78.
Медицинские новости. – 2021. – №7. – С. 84-86.
Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.