Внимание! Статья адресована врачам-специалистам

Sultanova N.G., Allahverdieva L.I., Jafarova A.O.

Azerbaijan Medical University, Baku

Immunocorreging effect of vitamin D in patients with bronchial asthma

Резюме. Проведена оценка влияния препарата витамина D («Тридроп») на показатели экспрессии маркеров лимфоцитарной дифференцировки и активации на мононуклеарах периферической крови детей с атопической бронхиальной астмой. Все больные получали базисную противовоспалительную терапию в соответствии со степенью тяжести бронхиальной астмы и иммунокорригирующую терапию содержащим витамин D препаратом «Тридроп». У больных оценивали представительство в периферической крови трех основных популяций лимфоцитов: Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов и NK-клеток, а также маркера активации HLA-DR+. Проведено сравнение средних показателей экспрессии маркеров лимфоцитарной дифференцировки и маркера поздней активации на мононуклеарах периферической крови. Результаты исследования показали, что содержащий витамин D препарат «Тридроп» обладает определенным иммунокорригирующим эффектом на состояние клеточного иммунитета, которое было оценено по уровню экспрессии маркеров дифференцировки и активации на мононуклеарах периферической крови у больных бронхиальной астмой.

Ключевые слова: бронхиальная астма, витамин D, маркер дифференцировки, маркер активации.

Медицинские новости. – 2018. – №11. – С. 54–56.

Summary. The purpose of the study was to evaluate the effect of the vitamin D drug (Tridrop) on the expression of markers of lymphocyte differentiation and activation on peripheral blood mononuclear cells of children with atopic bronchial asthma. All patients received basic anti-inflammatory therapy in accordance with the severity of bronchial asthma and immunocorrective therapy with vitamin D containing Tridrop. Three main populations of lymphocytes were estimated in patients to represent peripheral blood: T lymphocytes, B lymphocytes and NK cells, and an HLA-DR + activation marker. The average expression of lymphocyte differentiation markers and a late activation marker on peripheral blood mononuclear cells was compared. The results of the study showed a definite immunocorreging effect of the vitamin D, containing Tridrop on the state of cellular immunity, which was assessed by the level of expression of differentiation and activation markers on peripheral blood mononuclear cells in patients with bronchial asthma.

Keywords: bronchial asthma, vitamin D, marker of differentiation, marker of activation.

Meditsinskie novosti. – 2018. – N11. – P. 54–56.

Среди различных заболеваний атопической природы патогенез бронхиальной астмы в значительной степени обусловлен механизмом хронического воспаления [1, 2, 4].

Ведущая роль иммунологических механизмов в развитии воспаления не вызывает сомнений, а переход острого воспаления в хроническое в значительной степени обусловлен нарушениями деятельности иммунной системы организма [4]. Поэтому установление роли иммунологических механизмов в развитии воспалительных реакций при бронхиальной астме, в частности у детей, имеет важное теоретическое и практическое значение.

Выявление состояния иммунологической недостаточности или гиперактивации в различных звеньях иммунной системы, а также возможного сочетания этих состояний при бронхиальной астме дает возможность уточнить патогенетические механизмы ее развития, а также разработать методы целенаправленной иммунокоррекции. Это, в свою очередь, позволит добиться терапевтического эффекта [1, 2].

В настоящее время в мире отмечено значение витамина D в развитии и течении бронхиальной астмы. Витамин D играет важную роль в регуляции клеточного и гуморального иммунитета, тем самым влияя на патогенез бронхиальной астмы [3]. Рецепторы витамина D обнаружены в различных клетках, включая клетки легких и иммунной системы. Описана связь между низким уровнем витамина D и появлением бронхиальной астмы у детей и взрослых [5].

Цель исследования – оценить влияние препарата витамина D («Тридроп») на показатели экспрессии маркеров лимфоцитарной дифференцировки и активации на мононуклеарах периферической крови детей с атопической бронхиальной астмой.

Материалы и методы

Для решения указанной цели нами было обследовано 63 ребенка, страдающих персистирующей формой атопической бронхиальной астмы легкого и среднетяжелого течения. Возраст обследованных детей составил от 3 до 17 лет. Диагноз был верифицирован на основании данных аллергологического анамнеза, результатов клинико-функциональных и иммунологических исследований. Длительность заболевания составляла от 2 до 5 лет. В качестве контрольной группы было обследовано 20 практически здоровых детей того же возраста, у которых в анамнезе не было указаний на аллергические проявления и отсутствовала наследственная отягощенность.

Уровень витамина D в крови определяли методом ELISA на аппарате RОСН. В группе здоровых детей показатель 25(ОН)D3 был в пределах нормы (30–100 нг/мл), а у больных он колебался в пределах 10,4–24,2 нг/мл, что значительно ниже показателей нормы.

Параметры иммунного статуса включали определение содержания в периферической крови лимфоцитов, экспрессирующих маркеры дифференцировки CD3+, CD4+, СD8+, СD16+, СD56+, СD19+ и маркер активации HLA-DR+. Лабораторное исследование проводили с использованием моноклональных антител (Becton Dickinson, США) методом проточной цитометрии на проточном цитометре Epics XL (Beckman Coulter, Франция) с применением автоматического программного обеспечения. Для обработки результатов использовали программу СellQuest (Becton Dickinson, США), применяя параметры прямого (FSC) и бокового (SSC) светорассеивания.

Все больные получали базисную противовоспалительную терапию в соответствии со степенью тяжести бронхиальной астмы. С целью проведения иммунокорригирующей терапии 30 детей получали содержащий витамин D препарат «Тридроп» из расчета 3 капли в сутки на протяжении 1 месяца.

Статистическая обработка данных проводилась с расчетом среднего арифметического и ошибки среднего арифметического с использованием программы Microsoft Excel.

Результаты и обсуждение

В соответствии с целью настоящего исследования у больных оценивали представительство в периферической крови трех основных популяций лимфоцитов: Т-, В-лимфоцитов и NK-клеток, а также маркера активации HLA-DR+. Результаты исследования влияния применения базисной терапии и в ее составе содержащего витамин D препарата «Тридроп» на экспрессию маркеров дифференцировки и активации представлены в таблице. Проведено сравнение средних показателей экспрессии маркеров лимфоцитарной дифференцировки и маркера поздней активации на мононуклеарах периферической крови.

В результате исследования установлено, что у больных первой группы наблюдения атопическая бронхиальная астма характеризуется повышением в периферической крови общего числа Т-хелперов (CD4+) – 40,4±1,4% против 36,8±0,5% в контроле (р<0,05), Т-супрессоров (СD8+) – 33,8±1,4% против 29,8±0,4% в контроле (р<0,05).

Во второй группе больных наблюдалось достоверное снижение в периферической крови общего числа Т-лимфоцитов (CD3+) – 64,9±2,9% против 70,4±0,7% в контроле (р<0,05). Анализируя материалы исследования, необходимо отметить, что при наблюдении больных атопической бронхиальной астмой, получавших базисную терапию с использованием препарата «Тридроп», процентное соотношение Т-клеточных субпопуляций (CD4+ и CD8+) в составе Т-лимфоцитарной популяции (CD3+) сохранялось, а их уровень практически не отличался от такового у здоровых детей (было зафиксировано незначительное и малодостоверное повышение CD4+ Т-лимфоцитов).

Показатели соотношения CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов в сравниваемых группах не отличались и соответствовали средним величинам нормы (таблица).

Таблица. Уровень экспрессии дифференцировочных и активационных маркеров на лимфоцитах больных атопической бронхиальной астмой в динамике лечения

Примечание: * – достоверность статистических показателей в сравнении с таковыми в группе контроля, р<0,05; ** – р<0,01; *** – р<0,001.

Поскольку проведенный нами количественный анализ иммунологических показателей не отражает полностью механизмы вовлечения иммунной системы в патологический процесс, нами было проведено изучение изменений экспрессии активационных маркеров лимфоцитов, характеризующих функциональное состояние иммунной системы. Как известно, широкое практическое применение в иммунодиагностике получили различные маркеры активации. Для оценки запуска активации лимфоцитов использовали маркер поздней активации – HLA-DR. При анализе содержания в крови больных лимфоцитов, экспрессирующих активационные антигены, было показано, что и у больных первой, и у больных второй группы наблюдается достоверное снижение HLA-DR+-лимфоцитов (7,54±0,67% и 5,50±0,72% соответственно против 13,0±0,64% в контроле, р<0,001).

Как видно из результатов таблицы, у детей первой группы в динамике лечения показатели маркеров дифференцировки значимо не изменялись, за исключением достоверного увеличения уровня Т-супрессоров (СD8+) – 36,4±2,0% против 29,8±0,4% в контроле (р<0,001). В то же время во второй группе больных, получавших коррекцию гиповитаминоза D, в динамике лечения наблюдалось достоверное повышение уровня Т-хелперов (СD8+) – 41,4±1,5% против 36,8±0,5% в контроле (р<0,01). Под влиянием проведенного лечения значения иммунорегуляторного индекса CD4+/CD8+ несколько возросли и составили 1,38±0,10 ед. против 1,23±0,02 ед. в контроле (р<0,05).

В то же время в обеих группах в динамике лечения не наблюдалось изменения числа активированных клеток (HLA-DR+), однако их изменения были достоверны: 6,44±0,84% и 5,0±1,18% соответственно против 13,0±0,64% в контроле (р<0,001).

Как показали наши исследования, содержащий витамин D препарат «Тридроп» обладает определенным иммунокорригирующим эффектом на состояние клеточного иммунитета, которое было оценено по уровню экспрессии маркеров дифференцировки и активации на мононуклеарах периферической крови у больных бронхиальной астмой.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Аймашев Н.Б., Перова Н.Ю., Прокофьева Т.В. // Новая наука: Стратегии и векторы развития. – 2016. – №4–3. – С.37–40.

2. Скучалина Л.Н. // Север России: стратегии и перспективы развития: Материалы III Всероссийской научно-практической конференции. в 3-х томах. – 2017. – С.136–140.

3. Снопов С.А. // Медицинская иммунология. – 2014. – Т.16, №6. – С.499–530.

4. Шуганов А.Е., Палеев Ф.Н., Распопина Н.А., Салмаси Ж.М., Шуганов Е.Г. // Архивъ внутренней медицины. – 2015. – №3 (23). – С.56–62.

5. Brehm J.M. // Am. J.Respir. Crit. Care Med. – 2009. – Vol.179, N9. – P.765–771.

Медицинские новости. – 2018. – №11. – С. 54-56.

Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.