Ismanly A.S., Muradov H.K., Qaziyev A.Y.

Oncologycal Сlinic of Azerbaijan Мedical Univercity, Baku

Qualitative and quantitative characterization

of tumor cells in different types of Merkel carcinoma

Резюме. Опухоль Меркеля – редкая высокоагрессивная неоплазия, на ее долю приходится менее 1% опухолей кожи. Диагностика этой патологии возможна лишь при использовании электронной микроскопии и специфических методов окрашивания. Морфологическая структура опухоли Меркеля, в частности число и функциональная активность составляющих ее клеток, специфична, что проявляется при постановке гистохимических реакций. В контингент исследования включено 86 больных с установленным диагнозом «нейроэндокринный рак кожи». Выявлены определенные качественные и количественные различия апудоцитов различных вариантов карциномы Меркеля. Полученные результаты показывают, что для каждого гистологического варианта карциномы Меркеля характерны определенные качественные и количественные гистохимические показатели, коррелирующие с локализацией опухоли и позволяющие проводить дифференциальную диагностику между ее вариантами.

Ключевые слова: карцинома Меркеля, гистологические виды карциномы Меркеля.

Медицинские новости. – 2015. – №3. – С. 71–74.

Summary. Merkel tumor – a rare very aggressive neoplasia, which accounts for less than 1% of skin tumors. Diagnosis of this disease is only possible by using electron microscopy and specific staining techniques. The morphological structure of the Merkel tumor, in particular the number and functional activity of its constituent cells is characteristic, that manifests itself in setting histochemical reactions. 86 patients with an established diagnosis «neuroendocrine cancer of skin» included in the population of the study. The results show that for each histological variant Merkel cell carcinoma is characterized by certain qualitative and quantitative histochemical indicators, which correlate with the localization of the tumor and allow differential diagnosis between its variants.

Keywords: Merkel carcinoma, histlological types of Merkell cell cancer.

Meditsinskie novosti. – 2015. – N3. – P.  71–74.

Опухоль Меркеля (ОМ) – редкая высокоагрессивная неоплазия, на долю которой приходится менее 1% опухолей кожи. В структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями в Азербайджане рак кожи составляет 12–14% [1]. Частота встречаемости карциномы Меркеля (КМ) составляет в среднем 3 случая на 1 миллион населения в год [4, 5]. Диагностика этой патологии возможна только при использовании электронной микроскопии и специфических методов окрашивания [2, 3]. Морфологическая структура опухоли Меркеля, в частности число и функциональная активность составляющих ее клеток, специфичнана, что проявляется при постановке гистохимических реакций [2–4].

При окрашивании гематоксилин-эозином выделяют три подвида нейроэндокринного рака кожи (НЭРК): трабекулярный, промежуточный и мелкоклеточный, обладающие рядом определенных отличительных свойств [5–7].

Цель исследования – изучить особенности морфологической структуры опухоли Меркеля на клеточном уровне при постановке гистохимических реакций и установить характер клеточной активности в зависимости от варианта опухоли.

Материалы и методы

В контингент исследования включено 86 больных с установленным диагнозом НЭРК. Использовались следующие гистохимические реакции:

– гематоксилин-эозин;

– аргирофильная реакция по Гримелиусу в прописи В.М. Успенского и В.Ю. Голофеевского (1980), а также в прописи Б.М. Коркмазова и Х.К. Мурадова (1989);

– окрашивание 4% водным раствором уксусно-кислого урана (уранаффинная реакция);

– аргентаффинная реакция по Массону–Гамперлю в модификации Singh (пропись В.М. Успенского и В.Ю. Голофеевского (1980);

– альдегид-фуксиновая реакция по Гомори (1960) в модификации В.Ф. Майоровой.

Материал для гистологического и гистохимического исследования фиксировался соответственно в 10% нейтральном формалине и смеси Буэна.

Результаты и обсуждение

На основании проведенных гистологических и гистохимических методов окрашивания среди 86 пациентов с КМ были выделены три варианта опухоли: трабекулярный (9; 10,5±2,9%), промежуточный (60; 69,7±1,5%) и мелкоклеточный (17; 19,8±2,6%). В эпидермисе практически всех исследованных участков кожи взрослого человека гистохимически обнаружены клетки с проявлениями секреторной деятельности. Обладая принципиально однотипными светооптическими и ультраструктурными признаками структуры и функционирования, отмеченные клетки характеризуются и рядом региональных особенностей. Далее представлено детальное описание структуры и функциональной активности, а также оценены количественные параметры апудоцитов при различных вариантах ОМ.

Трабекулярный вариант. В результате исследования обнаружено, что данный подвид НЭРК характеризуется наличием определенной взаимосвязи между количеством и секреторной активностью апудоцитов, с одной стороны, и степенью выраженности кератинизации, с другой (табл. 1). Так, среднее число апудоцитов на участках с высоким уровнем кератинизации, к которым относятся ладонь и подошва, составляет 16,3±0,8 и 16,0±0,7 соответственно. В других регионах кожи эти показатели были значительно ниже: волосистая часть головы – 6,0±0,3; шея – 5,1±0,1; спина – 5,0±0,1; живот – 2,8±0,1; плечо – 2,6±0,1; предплечье – 2,6±0,1; бедро – 2,9±0,1, голень – 2,5±0,1. Разница статистически достоверна (р<0,01).

Таблица 1. Количественное гистохимическое распределение апудоцитов в различных регионах кожи при трабекулярном варианте опухоли Меркеля

Визуальное содержание внутриклеточного субстрата оценивалось в баллах. Максимальные показатели наблюдались в области ладоней и подошв, т.е. участках кожи с повышенной кератинизацией, – в пределах 2 баллов, в других регионах кожи этот показатель был менее 1,7 балла.

Нами было выделено два основных типа апудоцитов (на основании их гистохимических свойств) – это аргирофильные и параальдегид-фуксинофильные клетки. Установлено, что их количество и секреторная активность варьируют в зависимости от подвида ОМ. При трабекулярном варианте НЭРК в участках с наибольшим количеством функционально-активных апудоцитов (ладонь и подошва) преобладают апудоциты с аргирофильными свойствами. Их количественное содержание (в процентах от всей популяции) в указанных регионах составило 70,3±2,6 и 73,5±3,0 соответственно. Количество параальдегид-фуксинофильных клеток было достоверно меньше и равнялось 26,4±1,0 на ладони и 20,0±1,0 на подошве.

В других регионах кожи аргирофильные и параальдегид-фуксинофильные апудоциты встречались практически в равных соотношениях (с незначительными отклонениями). Их количественные показатели на волосистой части головы составили 44,6±2,4 и 48,2±2,2; на шее – 46,1±2,3 и 48,2±2,2; на спине – 37,5±1,7 и 57,4±2,9; на животе – 36±1,7 и 60±3,0; на плече – 43,8±2,2 и 49,3±2,4; на предплечье – 48,0±2,3 и 50,3±2,3; на бедре – 51±2,6 и 40±2,2; на голени – 54±2,5 и 43,4±2,1 соответственно.

Максимальное визуальное содержание внутриклеточного субстрата было обнаружено в аргирофильных апудоцитах ладони и подошвы (2,2 и 2,3 балла соответственно). В параальдегид-фуксинофильных апудоцитах ладони и подошвы, а также аргирофильных и параальдегид-фуксинофильных апудоцитах других областей кожи визуальное содержание внутриклеточного субстрата не превышало 1,9±0,1 балла, варьируя в пределах от 1,2±0,05 до 1,9±0,1.

Промежуточный вариант. В отличие от описанного выше трабекулярного варианта, выраженной связи с процессом кератинизации не обнаружено. Опухолевые клетки локализованы преимущественно в области волосистой части головы и на шее, а также в области спины и живота, плеча, предплечья, бедра и голени. Подробная характеристика апудоцитов дана в табл. 2.

Таблица 2. Количественное гистохимическое распределение апудоцитов в различных регионах кожи при промежуточном варианте опухоли Меркеля

Наиболее высокие цифры среднего числа апудоцитов наблюдались в зоне волосистой части головы – 7,8±0,3. Сходные показатели обнаружены также на шее – 6,0±0,2, а также в регионах бедра и голени – 6,0±0,3 и 6,1±0,3. На коже спины эти значения равнялись 4,4±0,1, живота – 4,1±0,1, плеча – 3,0±0,2 и предплечья – 4,0±0,2 (р<0,01).

Визуальное содержание внутриклеточного субстрата, оцениваемое в баллах, было наиболее высоким в апудоцитах шеи – 2,4±0,1, а также в клетках волосистой части головы – 2,2±0,1. Наиболее низкие показатели отмечались в области спины – 1,0±0,1. Содержание внутриклеточного субстрата в других регионах кожи: на животе – 2,0±0,1, на плече – 1,8±0,1, на предплечье – 1,8±0,1, на бедре – 1,9±0,1 и на голени – 1,7±0,1 (р<0,01).

При промежуточном варианте опухоли Меркеля, в отличие от трабекулярного, не наблюдалось постоянного численного преобладания какой-либо одной субпопуляции апудоцитов. И аргирофильные, и параальдегид-фуксинофильные апудоциты встречались примерно в равных соотношениях, с незначительным процентным перевесом тех или других в зависимости от региона кожи. Так, на волосистой части головы преобладали аргирофильные апудоциты, их количество (в % от всей популяции) составило 65,4±2,8, количество параальдегид-фуксинофильных клеток было 28,1±1,1. На шее обнаружены сходные показатели – 64±3,1 и 32±1,5. На спине процентное содержание аргирофильных апудоцитов было меньше – 41,7±2,0, преобладали апудоциты с параальдегид-фуксинофильными свойствами – 53±2,5. На животе эти значения составили 44,4±1,8 и 53±2,5% соответственно. На плече и предплечье большая часть клеток представлена аргирофильной субпопуляцией, параальдегид-фуксинофильные апудоциты встречаются несколько реже: 51±1,9 и 44±2,2% на плече, 52±2,8 и 41,7±2,3% на предплечье. На бедре и голени частота встречаемости апудоцитов идентична таковой на верхних конечностях, т.е. наблюдается незначительное превалирование аргирофильных апудоцитов. В области бедра количество аргирофильных апудоцитов составило 50,8±2,3, а параальдегид-фуксинофильных – 47,5±2,0. На голени эти показатели были соответственно 50,4±2,2 и 46±2,4%.

Наиболее высокие значения визуального содержания внутриклеточного субстрата наблюдались в апудоцитах волосистой части головы и шеи. Так, в аргирофильных апудоцитах волосистой части головы этот показатель составил 2,3±0,1, в параальдегид-фуксинофильных – 2,2±0,2 балла. На шее эти цифры равнялись соответственно 2,3±0,1 и 2,2±0,2. Таким образом, в перечисленных регионах кожи и аргирофильные, и параальдегид-фуксинофильные апудоциты обладают практически одинаковой секреторной активностью.

На спине содержание внутриклеточного субстрата в клетках аргирофильной субпопуляции было 1,9±0,1 балла, параальдегид-фуксинофильной – 2,0±0,1; на животе – 1,9±0,1 и 2,2±0,1; на плече – 2,2±0,1 и 1,8±0,9; на предплечье – 2,2±0,1 и 1,8±0,9; на бедре – 2,0±0,1 и 1,8±0,8 и на голени – 2,0±0,1 и 2,0±0,1 соответственно. Иными словами, в области спины и живота функциональная активность параальдегид-фуксинофильных апудоцитов несколько выше, чем аргирофильных; тогда как на верхних и нижних конечностях (за исключением ладоней и подошв), наоборот, визуальное содержание внутриклеточного субстрата в аргирофильных клетках больше, чем в параальдегид-фуксинофильных.

Мелкоклеточный вариант. Клетки с гистохимическими признаками нейросекреции обнаружены в гистоструктурах волосяных фолликулов. Как и аналогичные клетки в эпидермисе, апудоциты в волосяных фолликулах по сути структуры и секреторной деятельности однотипны, вместе с тем, характеризуются и рядом региональных особенностей (табл. 3).

Таблица 3. Количественное гистохимическое распределение апудоцитов в различных регионах кожи при мелкоклеточном варианте опухоли Меркеля

Для мелкоклеточного варианта опухоли Меркеля характерны наиболее высокие показатели среднего числа апудоцитов, которые выявлены в эпидермисе волосистой части головы и шеи – 10,9±0,3 и 8,9±0,2 соответственно, а также в коже бедра – 8,9±0,3 и голени – 9,3±0,3. В остальных регионах кожи данный показатель примерно одинаков, его значения по областям следующие: кожа живота – 7,1±0,3, спины – 7,0±0,4, плеча – 7,4±0,3 и предплечья – 7,1±0,3.

Визуальное содержание внутриклеточного субстрата превышает таковые при двух предыдущих вариантах опухоли Меркеля, его значения в большинстве случаев больше или равны 2. На волосистой части головы встречались апудоциты с максимальным содержанием внутриклеточного субстрата, оцененного в 3,0±0,3 балла. На коже бедра и голени этот показатель составил 2,8±0,1, спины – 2,2±0,1, живота – 2,0±0,1, плеча – 2,1±0,1 и предплечья – 2,0±0,1.

Как и при трабекулярном и промежуточном подвидах карциномы Меркеля, при мелкоклеточном варианте также встречаются в основном апудоциты двух видов – аргирофильные и параальдегид-фуксинофильные. Их соотношение меняется в зависимости от регионов кожи и волосяного покрытия. На волосистой части головы количество аргирофильных и параальдегид-фуксинофильных клеток приблизительно одинаково и составляет (в % от всей популяции) 48,4±2,3 и 47,5±2,4 соответственно. На шее их количество равнялось 47,6±2,4 и 47,1±2,2% соответственно. На коже спины наблюдалось незначительное количественное преобладание аргирофильных апудоцитов – 49±2,2%, параальдегид-фуксинофильных апудоцитов было 46,4±2,1%. На коже живота, наоборот, превалировали параальдегид-фуксинофильные клетки – 49,7±2,3% (аргирофильные составили 46,7±2,2%).

Количество аргирофильных и параальдегид-фуксинофильных апудоцитов в других регионах кожи было следующим: на коже плеча – 49,6±2,3 и 48,3±2,3%; предплечья – 49,6±2,3 и 47,5±2,2%; бедра – 51,0±2,4 и 47,0±2,3% и голени – 47,7±2,3 и 46,9±2,6% соответственно. Как видно из представленных данных, на коже плеча и голени обе субпопуляции клеток встречаются практически в равных соотношениях, тогда как в области предплечья и бедра отмечается небольшой перевес в сторону аргирофильных клеток.

Максимальное содержание внутриклеточного субстрата наблюдалось в аргирофильных апудоцитах волосистой части головы и бедра – 2,9±0,1 и 2,6±0,1% соответственно. Для сравнения приведем данные количественного распределения внутриклеточного субстрата в параальдегид-фуксинофильных клетках этого региона – 2,5±0,08 и 2,2±0,04 (р<0,01).

Визуальное содержание внутриклеточного субстрата в аргирофильных и параальдегид-фуксинофильных клетках на коже шеи было одинаково – 2,2±0,1 балла, на коже живота – 2,0±0,1 и 1,6±0,09, плеча – 2,0±0,1 и 1,7±0,08, предплечья – 1,9±0,1 и 1,8±0,05, бедра – 2,6±0,1 и 2,2±0,04 и в области голени – 2,4±0,1 и 2,5±0,03 балла в обеих субпопуляциях апудоцитов соответственно. Т.е. на коже плеча и предплечья, а также в области бедра наблюдалось незначительное превалирование функциональной активности аргирофильных апудоцитов.

Таким образом, проведенное исследование выявило наличие качественных и количественных гистохимических различий показателей трабекулярного, промежуточного и мелкоклеточного вариантов КМ. Нами была установлена достоверная статистическая зависимость между количественным распределением и функциональной активностью клеток и процессом кератинизации при трабекулярном варианте ОМ.

При промежуточном варианте опухоли Меркеля обнаруженные апудоциты отличаются количественным содержанием, формой, размерами, а также по основным ультраструктурным и гистохимическим параметрам, отражающим уровень и характер секреторной деятельности этих клеток.

Гистохимически при мелкоклеточном варианте опухоли Меркеля наибольшее количество функционально активных апудоцитов распределено в волосяных фолликулах, меньшее – в составе эпидермиса, и наименьшее – в сальных железах кожи.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Qaz?yev A.Y. Az?rbaycanda b?dxass?li sisl?rin epidemiologiyas?, tibbi, demoqrafik v? social-iqtisadi aspektl?ri: Tibb elml?ri doktoru alimlik d?r?c?sin? iddia olunan dissertasiya. – Bak?, 2005. – 412 s.

2. Райхлин Н.Т., Кветной И.М., Барышевская Л.А. // Архив патологии. – 2000. – Т.62, №2. – С.57–60.

3. Яглов В.В. // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. – 1989. – Т.96, №1. – С.14–29.

4. Goedert J.J., Bhatia K.G. et al. // J. Clin. Oncol. – 2009. –Vol.27, N24. – P.4021–4026.

5. Xie H., Lee L., Caramuta S. et al. // J. Invest. Dermatol. –2014. – Vol.134, N2. – P.507–517.

6. Lemos B.D., Storer B.E., Iyer J.G. // J. Am. Acad. Dermatol. – 2010. – Vol.63, N5. – P.751–761.

7. Ngihem L. // Arch. Dermatol. – 2003. – Vol.139. – P.1641–1643.

Медицинские новости. – 2015. – №3. – С. 71-74.

Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.