Протезные стоматиты развиваются под действием местных (локальных) и системных факторов, длительной антибиотико- и гормональной терапии, а также химических компонентов базисов протезов. Токсическое влияние различных видов протезов на слизистую оболочку усиливает адгезию патогенных микроорганизмов. Ассоциация C. albicans и S. aureus обладает высокой адгезивностью к слизистой ротовой полости [3, 4]. Факторы, способствующие развитию грибково-бактериальных ко-инфекций, изучены не полностью. Переход бластоконидий в гифы, продукция экстрацеллюлярных ферментов – протеиназ и фосфолипаз, обеспечивающих адгезию кандид к слизистой оболочке рта, усиливаются под действием оральной среды (температура, pH, концентрация углеводов) [1, 2, 5, 6].
Съемные ортопедические конструкции могут колонизироваться микроорганизмами, образующими слой биопленки, который был выявлен благодаря экстрацеллюлярным веществам, продуцируемым ими. По данным некоторых исследователей, биопленки, образующиеся на зубных протезах у пациентов со стоматитами, в основном были бактериальной природы. Белки ротовой жидкости, выявляющиеся на поверхности слизистой оболочки полости рта и различных зубных протезов, выполняют роль специфических рецепторов для C. albicans и других микроорганизмов [1, 2].
Цель исследования – определение частоты выявляемости C. albicans, S. aureus, S. mutans у пациентов в слизистой оболочке полости рта и на зубных протезах, изготовленных из различных материалов, и выявление связи ассоциаций этих микроорганизмов с различными ко-факторами.
Материалы и методы
К исследованию были привлечены 124 пациенты, обратившиеся в стоматологическую клинику Азербайджанского медицинского университета. Средний возраст – 45–60 лет. Они не использовали ранее зубные протезы, не имели противопоказаний к протезированию, которые могли бы быть связаны с признаками стоматита в ротовой полости. Все пациенты в результате случайного выбора были разделены на четыре группы.
При изготовлении протезов для пациентов первой группы (n=31) был использован фторакс; второй (n=30) – термопласт, третьей (n=31) – мелодент, четвертой (n=32) – этакрил. Все были ознакомлены с правилами использования зубных протезов, гигиены полости рта и протезов, предупреждены о необходимости снимать протезы на ночь.
Для выявления корреляции при применении различных типов протезов и возникновении протезных стоматитов у лиц с адентией микробиологические исследования проводились с первого дня ношения протезов и повторно спустя 6 месяцев. Пациенты были обследованы за 3 часа до взятия слюны. Слюна была взята и у пациентов со стоматитом, и у тех, у кого он не был выявлен.К микробиологическим исследованиям были привлечены все пациенты, использующие протезы.
Всем, согласившимся участвовать в исследованиях и прошедших клиническое обследование, было предложено заполнить анамнестическую опросную анкету. В течение пяти минут, не прибегая к стимуляции, от каждого пациента было собрано по 2 мл слюны в стерильную посуду. Сразу же после снятия зубных протезов с внутренней их поверхности из всех возможных мест контакта зубных протезов со слизистой оболочкой протезного ложа собирали материал с помощью стерильных ватных тампонов. Взятые образцы были немедленно помещены в транспортную среду Стюарта и для дальнейших исследований направлены в научно-исследовательскую лабораторию кафедры микробиологии и иммунологии АМУ.
Была измерена рН слюны. Для изоляции и идентификации C. albicans были использованы современные системы (методы). В частности, для культивирования дрожжей был использован хромоген CandiSelect агар (Boi-Rad, Франция), содержащий глюкозу, питательные вещества, цветной субстрат и антибиотики, подавляющие рост бактериальной флоры. Синие колонии, образуемые на данной среде, были идентифицированы как колонии C. albicans. Результаты, полученные с хромогенного агара, были подтверждены тестом ростковой трубки на сыворотке. Для изоляции и идентификации S. aureus культивировали на селективной среде, содержащей маннитол и 5% бараньей крови. Селективная среда Mannitol saltсодержит 7,5% NaCl, маннитол и, в качестве кисло-щелочного маркера, феноловый красный. Идентификация была осуществлена по колониям S. aureus, образующих вокруг колоний золотистый ореол. В дополнение с колониями, образующими зоны β-гемолиза, на кровяном агаре были поставлены плазмокоагулазный и каталазный тесты.
Для идентификации S. mutans образцы инокулировались на агар Mitis Salivarius. На этой среде S. mutans образует выпуклые, темно-синие, без четких краев колонии, имеющие волнистый темный центр и гранулированную поверхность. Культивация проводилась при температуре 37°С. Через 24–48 часов был отмечен рост колоний, которые подвергались идентификации.
Результаты и обсуждение
В табл. 1 дана общая клиническая характеристика пациентов. В I группу входил 31 (50,8%) чел., во II–30 (49,2%) чел., в III – 31 (49,2), в IV – 32 (50,8) чел. Возраст пациентов от 45 до 60 лет, в среднем 58,24±8,2. Измеренный потенциометром рН ротовой жидкости составил в среднем в I, III и IV группе – 5,2; во II – 5,7.
Таблица 1. Микробиоценоз ротовой полости пациентов при ношении протезов из различных материалов, абс. (%)
Показатель
|
I группа (фторакс)
|
II группа (термопласт)
|
III группа (мелодент)
|
IV группа (этакрил)
|
pH ротовой жидкости
|
5,2
|
5,7
|
5,2
|
5,2
|
Колонизация слизистой
|
Candida albicans
|
24(77,4±7,51)
|
8 (26,6±8,07)
|
15 (48,4±8,98)
|
16 (50,0±8,84)
|
Staphylococcus aureus
|
18(58,1±8,86)
|
5 (16,6±6,79)
|
11 (35,5±8,59)
|
12(37,5±8,56)
|
Streptococcus mutans
|
21(67,8±8,40)
|
6 (20±7,30)
|
14 (45,2±8,94)
|
13(40,6±8,68)
|
Колонизация протезов
|
Candida albicans
|
17(54,8±8,94)
|
18 (60,0±8,94)
|
17 (54,9±8,94)
|
18(56,2±8,77)
|
Staphylococcus aureus
|
9 (29,0±8,15)
|
16 (53,3±9,11)
|
14(45,2±8,94)
|
16(50,0±8,84
|
Streptococcus mutans
|
12 38,7±8,75)
|
16 (53,3±9,11)
|
15(48,4±8,98)
|
14(43,7±8,77)
|
Протезный стоматит был обнаружен у 54,8% пациентов в I группы и у 16,7% – во II группе. У лиц со стоматитом, использующих акриловые протезы, воспалительный процесс локализовался в мягком нёбе в 29,4% случаев, в твердом нёбе – 23,5%. У 47,1% пациентов локализация воспалительного процесса была отмечена как в мягком, так и в твердом нёбе (табл. 2).
Таблица 2. Локализация протезного стоматита при ношении протезов из фторакса и термопласта, абс. (%)
Показатель
|
I группа (фторакс)
|
II группа (термопласт)
|
Развитие протезного стоматита
|
17 (54,8±8,94)
|
5 (16,7±6,81)
|
Мягкое нёбо
|
5 (29,4±11,05)
|
3 (60,0±21,91)
|
Твердое нёбо
|
4 (23,5±10,28)
|
2 (40,0±21,91)
|
Мягкое и твердое нёбо
|
8 (47,1±12,11)
|
–
|
У больных со стоматитами, использующих термопластические протезы, воспалительный процесс локализовался в 60% случаев в мягком нёбе, в 40% – в твердом нёбе. Одновременного поражения мягкого и твердого нёба в этой группе пациентов не выявлено, что указывает на значительное снижение уровня стоматитов при использовании термопластических протезов.
Колонизация слизистой оболочки и поверхности протезов микроорганизмами в первой группе:
C. albicans были выделены из ротовой полости 24 (77,4%) пациентов. У 22 пациентов выявлен Candida-ассоциированный атрофический протезный стоматит. Обнаружена Candida-колонизация 17 зубных протезов (54,8%).
S. aureus был выделен из оральной мукозы 18 (58,1%) человек. Протезный стоматит, ассоциированный с S.aureus, выявлен у 14 человек. У 9 (29%) пациентов на зубных протезах выявлены стафилококки.
S. mutans были выделены из оральной мукозы 21 (67,7%) пациентов. У 7 пациентов со стоматитом в оральной мукозе выявлена ассоциативная роль S. mutans, у 12 (38,7%) пациентов обнаружена колонизация зубных протезов этими микроорганизмами.
Микробная колонизация слизистой рта и поверхности протезов во второй группе:
C. albicans выделены из оральной мукозы 8 пациентов (26,6%). У 5 пациентов был выявлен Candida-ассоциированный атрофический протезный стоматит, обнаружена Candida-колонизация 18 зубных протезов (60%).
S. aureus был изолирован из слизистой 5 (16,6%) человек. Протезный стоматит, ассоциированный с S.aureus, выявлен у 3 человек. У 16 пациентов на поверхности зубных протезов выявлены стафилококки (53,3%).
S. mutans были выделены из оральной мукозы 6 (20%) пациентов. У 2 пациентов со стоматитом выявлена ассоциативная роль S. mutans, у 16 (53,3%) пациентов обнаружена колонизация зубных протезов этими микроорганизмами.
Степень колонизации микроорганизмами слизистой оболочки ротовой полости пациентов, использующих протезы, также существенно различалась.
Развитие системных заболеваний, тип питания, правила гигиены, а также ношение протезов на основе различных материалов, приводящие к изменению оральной микрофлоры у пожилых людей, способствуют развитию повреждений полости рта.
Снижение рН ротовой жидкости способствует увеличению адгезивной способности грибов к слизистой и акриловым протезам, что усиливает колонизацию слизистой C. albicans.
В ходе наших исследований у пациентов со стоматитами, использующих фтораксные протезы, была обнаружена колонизация C. albicans, S. aureus, S. mutans, связанная со сдвигом рН в кислую сторону, что способствует развитию протезных стоматитов.
Выявлена высокая частота изоляции C. albicans с поверхности термопластических протезов. C. albicans были обнаружены на 17 (54,8%) протезах в I группе, и на 18 (60%) – во II группе. Из бактерий: S. aureus – 9 (29%) протезов в I группе, 16 (53,3%) – во II; S. mutans – 12 (38,7%) в I и 16 (53,3%) – во II группе. Более высокая микробная колонизация термопластических протезов по сравнению с акриловыми объясняется двумя причинами: отсутствием токсичности термопластических протезов и менее гладкой их поверхностью по сравнению с более полированной поверхностью акриловых. Вышеуказанные причины и создают условия для колонизации поверхностей протезов микроорганизмами.
В результате культивации образцов ротовой жидкости также часто выявлялись C. albicans. Однако в данном случае именно у пациентов, использующих акриловые протезы, а не протезы на основе термопласта, отмечена наибольшая частота изоляции микроорганизмов из слизистой ротовой полости. Так, C. albicans были выделены из ротовой полости у 24 (77,4%) пациентов I группы, у 8 (26.6%) – во II группе; S. aureus – у 18 (58,1%) человек I группы и всего у 5 (16,6%) – во II группе; S. mutans – у 21 (67,8%) пациентов I группы и всего у 6 (20%) – во II группе.
Колонизация слизистой оболочки и поверхности протезов микроорганизмами в третьей и четвертой группах:
При сравнительном анализе данных, полученных при микробиологических исследованиях полости рта у 63 пациентов, пользующихся протезами с конструкциями из мелодента (III группа) и этакрила (IV группа), также была выявлена высокая степень адгезии патогенной микрофлоры. Колонизация протезов из этакрила Candidaalbicans выявлена в 56,2±8,77% случаев. Максимальные значения по обсемененности конструкций Str. mutans (48,4±8,98%) наблюдались при использовании в качестве базисного материала пластмассы «Мелодент» (см. табл. 1).
Таким образом, интенсивность повреждения ротовой полости обусловлена несколькими причинами, в частности использованием протезов на ночь. Токсичный материал в составе протезов оказывает различного рода влияние на слизистую оболочку ротовой полости в течение суток. Снижается реактивность местных иммунных факторов, в результате постоянного раздражения акриловыми пластмассами усиливается адгезия микроорганизмов к слизистой.
Несмотря на выраженную колонизацию поверхности термопластических протезов микроорганизмами, у лиц, использующих такие протезы, развитие стоматитов наблюдалось в значительно меньшей степени и была отмечена меньшая колонизация слизистой фунгальной и бактериальной флорой.
У лиц, использующих протезы на основе фторакса, выявлена высокая степень колонизации оральной мукозы.
Результаты исследований показывают высокий уровень микробной колонизации как слизистой оболочки протезного ложа, так и поверхности самого протеза и определяют необходимость повышения качества протезирования путем применения более инертных базисных материалов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Василенко З.С. Функциональные и морфологические изменения в слизистой оболочке полости рта и ее рецепторном аппарате под влиянием съемных протезов: автореф. ...дис. д-ра мед. наук. – Киев, 1977. – 41 с.
2. Лебедев К.А., Журули Н.Б., Понякина И.Д. и др. // Стоматология для всех. – 2007. – № 2.– С. 18–23.
3. Baena-Monroy T., Moreno-Maldonado V., Franco-Martínez F., et all. // Med. Oral. Patol. Oral Cir. Bucal. – 2005. – Vol.10, suppl. 1. – P. 27–39.
4. Chandra J., Kuhn D.M., Mukherjee P.B. et al. // J. Bacteriol. – 2001. –Vol. 183. – Р. 5385–5394.
5. Douglas L.J. // Rev. Iberoam. Micol. – 2002. – Vol. 19. – Р. 139–143.
6. Jabra-Rizk M.A., Falkler W.A. et al. // Rev. Iberoam. Micol. – 2001. – Vol. 18. – Р. 17–22.
Современная стоматология. - 2010. - №2. - С. 103-105.
Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.