Внимание! Статья адресована врачам-специалистам

Ashurova U.A., Najmutdinova D.K., Abdullaeva L.M., KamiIova I.A.

Tashkent Medical Academy, Uzbekistan

Association of C -174G polymorphism

of the IL-6 gene in the development of postpartum hemorrhage

Резюме. Выявлена генетическая предрасположенность к послеродовому кровотечению (ПРК), определены группы риска и разработаны профилактические меры, исследован полиморфизм C-174G в гене IL-6. Обследовали 101 женщину с атоническим ПРК. Наблюдаемая частота функционально неблагоприятного аллеля C была статистически несущественно выше среди женщин с послеродовой атонией (основная группа) по сравнению с контрольной выборкой (19,3% против 18,4%), тогда как аллель G был более распространен в контрольной группе (81,6% против 80,7%). Не выявлено значимой ассоциации с риском ПРК у первородящих женщин с рецессивным аллелем С и гомозиготным мутантным генотипом СС ([C] ?²=0,4; p=0,6; OR=0,8; 95% CI 0,4–1,63; [C/C] ?²=0,4; p=0,6; OR=0,5; 95% CI 0,06–4,4). Полиморфизм C-174G гена IL-6 не проявил себя как ген-кандидат, повышающий риск развития послеродового кровотечения.

Ключевые слова: послеродовое кровотечение, атония матки, полиморфизм C-174G в гене IL-6, генетические мутации, цитокины.

Медицинские новости. – 2024. – №4. – С. 66–69.

Summary. This study was aimed to evaluate the C-174G polymorphism of the IL-6 and the risk of postpartum atonic hemorrhage (PPH). 101 women with postpartum atonic bleeding of varying severity were studied. Frequency of mutant allele C was statistically insignificantly higher among women with postpartum atony (main group) compared to the control sample (19.3% versus 18.4%), while the G allele was more common in the control group (81.6% versus 80.7%). There was no significant association with the risk of PPH in primiparous women with the risky recessive allele C and the homozygous mutant CC genotype ([C] ?²=0.4; p=0.6; OR=0.8; 95% CI 0.4–1.63; [C/C] ?²=0.4; p=0.6; OR=0.5; 95% CI 0.06–4.4). Polymorphism of IL-6 gene did not manifest itself as a candidate gene that has a risk effect for developing PPH.

Keywords: postpartum hemorrhage, uterine atony, C-174G polymorphism in IL-6 gene, genetic mutation.

Meditsinskie novosti. – 2024. – N4. – P. 66–69.

Послеродовые кровотечения возникают в 3–10% случаев родов и выступают причиной 20% материнских смертей во всем мире [2, 7]. Хотя существует множество этиологий, наиболее распространенной является атония матки, которая составляет почти 70% случаев [17]. Пациенты, перенесшие кровотечение после родов, могут испытывать ухудшение качества жизни, что можно предотвратить, формируя группы риска, осуществляя раннюю подготовку и проявляя повышенную настороженность [2, 7].

В контексте обширного объема собранных данных императивной является потребность в реализации методологически корректных когортных исследований и рандомизированных клинических испытаний. Эти исследования должны быть направлены на оценку вмешательств, имеющих ключевое значение для антиципации, профилактики и терапии послеродового кровотечения (ПРК), обусловленного атонией матки. Разработка эффективных прогностических стратегий и профилактических мероприятий предполагает всестороннее осмысление патогенеза атонии матки, а именно, нарушений контрактильной функции миометрия. Понимание биохимических и молекулярных механизмов, лежащих в основе процессов сокращения и расслабления миометрия, является критическим для идентификации аномалий, способствующих развитию серьезных акушерских осложнений.

Осознание роли контрактильной функции миометрия имеет важное значение в контексте минимизации послеродового кровотечения. Исследования в этой области продолжаются, причем акцент делается на разработке фармацевтических агентов, целенаправленно воздействующих на патогенетические механизмы, участвующие в процессах сокращения и расслабления миометрия. В дополнение к этому детальное понимание патогенеза атонии матки углубляется через изучение метаболических путей, участвующих в регуляции контрактильности миометрия [11, 12].

Цитокины играют роль медиаторов в межклеточных и системных взаимодействиях и участвуют в модуляции защитных ответов организма. Локальные защитные реакции могут инициировать развитие воспаления, в то время как при их недостаточности цитокины могут активировать системные воспалительные процессы, ведущие к острофазовой реакции на уровне всего организма. Цитокины представляют собой небольшие растворимые белки (15–20 кДа), которые выполняют функцию передачи сигналов как к соседним клеткам, так и к отдаленным органам, при этом большинство из них взаимодействуют со специ-фическими рецепторами для передачи межклеточных сигналов. Они выполняют разнообразные функции в регуляции иммунных ответов, развития, метаболизма, старения и канцерогенеза. в контексте беременности, особенное значение имеет поддержание оптимального баланса между провоспалительными и противовоспалительными цитокинами в фетоплацентарном комплексе. Вариации в генах цитокинов могут влиять на скорость транскрипции, стабильность или функциональную активность мРНК и белковых продуктов, и обладают значимой этнической спецификой [5].

Следовательно, исследования генетических вариаций, особенно в экспрессии генов интерлейкинов, приобретают значительный интерес в контексте прогнозирования акушерско-гинекологических патологий. Сегодня внимание научного сообщества сосредоточено на изучении полиморфизма гена интерлейкина IL-6.

Цель исследования – оценить, как полиморфизм C-174G гена IL-6 может влиять на риск развития атонии матки после родов.

Материалы и методы

В ходе исследования проведен осмотр 101 женщины с диагностированным послеродовым атоническим кровотечением различной степени тяжести, включенных в основную группу. Установление диагноза атонического послеродового кровотечения осуществлялось в соответствии с критериями национального клинического протокола Республики Узбекистан «Профилактика и тактика ведения послеродовых акушерских кровотечений», утвержденного 1 марта 2021 года. Согласно данному протоколу, диагноз выставлялся при кровопотере ≥500 мл в ходе естественных родов; кровопотере ≥1000 мл в случае кесарева сечения; а также при любом клинически значимом объеме кровопотери, вызывающем гемодинамическую нестабильность, возникшем в течение 12 недель после рождения ребенка. Исключались женщины, у которых послеродовое кровотечение вызвано задержкой тканей последа или оболочек, травмами родовых путей или нарушениями свертываемости крови, не связанными с кровотечением. в контрольную группу вошли 103 женщины без выраженной хронической соматической патологии и с анамнезом естественных родов без осложнений и акушерской патологии. Все участницы исследования принадлежали к узбекской национальности и предоставили письменное информированное согласие на участие в исследовании.

Каждой женщине были проведены клинико-лабораторные и инструментальные исследования, включающие стандартные методы сбора анамнеза и физикального обследования.

Молекулярно-генетическое исследование проводилось на базе отдела молекулярной медицины и клеточных технологий НИИ гематологии и переливания крови Министерства здравоохранения Республики Узбекистан. Исследуемым материалом для изучения полиморфизма служила цельная венозная кровь. В молекулярно-генетическом анализе полиморфизма C-174G гена IL-6 использовались препараты геномной ДНК. Экстракция ДНК из периферической венозной крови осуществлялась с использованием набора «ДНК-Экстран-1» (производство компании «Синтол», Россия). Детекция полиморфизма выполнялась на приборах «Applied Biosystems» 2720 (США) и RT PCR Rotor-Gene 6000 (Corbett Research, Австралия) с применением набора ООО «Литех» (Москва), согласно инструкциям производителей. Продукты полимеразной цепной реакции (ПЦР) разделялись с помощью электрофореза в 2% агарозном геле.

Статистический анализ данных проводился с использованием программного пакета STATISTICA 10.0. Статистическая значимость различий между качественными характеристиками оценивалась с помощью точного критерия Фишера и критерия??² Пирсона. Соответствие распределения генотипов равновесию Харди – Вайнберга проверялось с помощью программы «GenePop» (http://wbiomed.curtin.edu.au/genepop) и оценивалось по критерию ?².

Результаты и обсуждение

При анализе возрастного состава пациенток не было выявлено статистически значимых различий. В процессе изучения акушерских характеристик в основной группе, где у женщин развилась послеродовая атония матки, наблюдалось преобладание повторнородящих (61,4%) по сравнению с первородящими (38,6%). Данное преобладание может быть обусловлено изменениями в рецепторном аппарате миометрия и сократительной функции мышечной ткани, происходящими с увеличением числа родов. У 27,7% женщин основной группы отмечалось осложненное течение беременности, что, согласно результатам, не оказывает существенного влияния на развитие послеродового кровотечения. Что касается временных рамок родоразрешения, то преждевременные роды в периоде с 29 по 36 неделю беременности были зафиксированы у 32,7% родильниц.

В рамках нашего исследования анализ частотного распределения генотипов C-174G гена IL-6, а также их соответствие равновесию Харди – Вайнберга был осуществлен отдельно для каждой из анализируемых групп – группы пациенток и контрольной группы. В обеих исследуемых группах наблюдаемое распределение частот генотипов данного полиморфизма соответствовало ожидаемым показателям согласно равновесию Харди – Вайнберга, что подтверждается статистически значимыми данными.

В таблице 1 представлены данные о частотном распределении генотипов и аллелей, связанных с полиморфизмом C-174G гена IL-6. Исследование выявило, что в выборке преобладала доминантная аллель G, фиксировавшаяся в 80,69% случаев, в то время как рецессивная аллель C обнаруживалась в 19,31% случаев. Что касается распределения генотипов, то мутантный генотип C/C встречался у 3,96% пациентов, гетерозиготный генотип C/G – у 30,69% пациентов, а доминантный генотип G/G – у 65,35% пациентов. В контрольной группе эти показатели составили 4,85%, 27,18% и 67,96% соответственно. Наблюдаемое распределение частот аллелей и генотипов соответствовало равновесию Харди – Вайнберга.

Таблица 1. Частота распределения аллелей и генотипов полиморфизма C-174G в гене IL-6 в группах пациентов и контроля

В целях определения потенциальных ассоциативных связей между аллельными и генотипическими вариантами полиморфизма C-174G гена IL-6 и развитием атонических послеродовых кровотечений проведен компаративный анализ распределения данного генетического маркера между исследуемыми группами пациенток и контролем. Статистически значимых различий в частоте встречаемости аллелей и генотипов между основной и контрольной группами не выявлено (p>0,05).

Наблюдаемая частота функционально неблагоприятного аллеля C была статистически несущественно выше среди женщин с послеродовой атонией (основная группа) по сравнению с контрольной выборкой (19,3% против 18,4%), тогда как аллель G был более распространен в контрольной группе (81,6% против 80,7%). Однако, согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов, риск развития послеродовых атонических кровотечений у носителей аллеля C увеличивается в 1,1 раза, что не является статистически значимым (табл. 2).

Таблица 2. Различия в частоте аллельных и генотипических вариантов полиморфизма C-174G в гене IL-6 в группах пациенток

Доминантный генотип G/G имел незначительно высшую частоту встречаемости в контрольной группе по сравнению с группой рожениц с ПРК (68% против 65,3%). Тем не менее, обнаруженные статистические различия не достигли уровня пороговой значимости (?²=0,2; p=0,7; OR=0,9; 95% CI 0,5–1,59), что указывает на отсутствие протективного эффекта данного генотипа в отношении развития ПРК у беременных.

Встречаемость гомозиготного мутантного генотипа C/C была схожей среди женщин с ПРК и в контрольной группе (4% и 4,9% соответственно), при этом данный генотип не выявлен как фактор риска развития послеродовых атонических кровотечений (?²=0,1; p=0,8; OR=0,8; 95% CI 0,21–3,09).

Частота гетерозиготного C/G генотипа полиморфизма C-174G гена IL-6 оказалась незначительно выше в основной группе по сравнению с контрольной (30,7% против 27,2%), что также не имеет статистической значимости (?²=0,3; p=0,6). Риск развития атонии матки у носителей этого генотипа после родов был на 1,2 раза выше по сравнению с другими генотипами (OR=1,2; 95% CI 0,65–2,17).

Для сопоставления фенотипических проявлений изучаемой нами патологии с генотипическими мы решили провести анализ некоторых клинических характеристик наших пациенток с данными генетического анализа. Далее пациентки основной группы были поделены на подгруппы первородящих и повторнородящих, где были выявлены значимые отличия от здоровых женщин.

Согласно данным таблицы 3, не было выявлено значимой ассоциации с риском ПРК у первородящих женщин с рисковым рецессивным алллем С и гомозиготным мутантным генотипом СС ([C] ?²=0,4; p=0,6; OR=0,8; 95% CI 0,4–1,63; [C/C] ?²=0,4; p=0,6; OR=0,5; 95% CI 0,06–4,4).

Таблица 3. Различия в частоте аллельных и генотипических вариантов полиморфизма C-174G в гене IL-6 у первородящих пациенток и контрольной группы

У повторнородящих женщин носительство мутантного аллеля С увеличивает риск развития атонического маточного кровотечения после родов у рожениц в 1,2 раза, но данная ассоциация оказалась статистически не значимой (?²=0,5, р=0,5). Гетерозиготный генотип G/С также продемонстрировал недостоверное влияние на риск развития ПРК у повторнородящих по сравнению с контролем, что увеличивает риск в 1,4 раза при ?²=0,8, р=0,4. Генотип G/G в нашем исследовании не проявил свою протективную роль у данной подгруппы женщин (табл. 4).

Таблица 4. Различия в частоте аллельных и генотипических вариантов полиморфизма C-174G в гене IL-6 у повторнородящих пациенток и контрольной группы

Цитокины, обладающие многофункциональными характеристиками, включая членов семейства IL-6, демонстрируют функциональную плейотропность и избыточность. Это семейство включает в себя 10 лигандов и 9 рецепторов, причем члены семейства обладают общей структурой ядра и используют общий преобразователь сигнала в их рецепторных комплексах, обеспечивая выполнение разнообразных функций в организме. В частности, ось IL-6 и его рецептор IL-6R способствует прогрессированию многих заболеваний [13]. IL-6, являющийся ярким примером цитокина, связанного с воспалительными заболеваниями, был первоначально идентифицирован в 1970-х годах группой ученых под руководством Кисимото как растворимый белок, продуцируемый Т-клетками и активирующий дифференцировку В-клеток в иммунной системе для продукции антител [16].

Были идентифицированы различные мутации в генах IL-6, его семейства и его рецепторов у человека, которые манифестируются как изменения фенотипа или функций организма [12]. Ген, отвечающий за синтез IL-6 у человека, локализован и картирован на хромосоме 7p21-24 [1]. Обычный гуаниновый (G)/цитозиновый (C) полиморфизм в промоторе IL-6 на позиции -174, влияющий на экспрессию белка in vivo, был изучен в контексте множества заболеваний [1, 3, 9, 10].

Доказательства свидетельствуют о том, что IL-6 синтезируется регулируемым образом в женских половых путях и тканях беременных с участием транс-сигнальных молекул, таких как sIL-6R и sgp130 [8,11]. Нарушение регуляции их функции ассоциируется с различными осложнениями беременности. Например, повышенные концентрации IL-6 при нормальной беременности, а также снижение его мРНК в средней секреторной и секреторной фазах менструального цикла, связанные с привычным невынашиванием, были зафиксированы в исследованиях. Также известно, что генетический полиморфизм может влиять на продукцию и концентрацию цитокинов [6].

IL-6 и его сигнальные регуляторы обнаруживаются в матке во время ее циклических изменений и активно участвуют в развитии ранних стадий беременности, в том числе в процессе имплантации эмбриона в материнский эндометрий и развитии плаценты. Некоторые исследования подтверждают важную роль IL-6 в функционировании плаценты через координацию пролиферации, дифференцировки и секреторной функции трофобласта [20].

Исследования, посвященные взаимосвязи между послеродовым атоническим кровотечением и полиморфизмом C-174G гена IL-6, на данный момент не проводились, что подчеркивает актуальность и новизну данной работы. Наши результаты пока не могут быть полностью сопоставлены с зарубежными исследованиями в этой области, поскольку наше исследование является первым в своем роде.

Заключение

У женщин с послеродовым атоническим кровотечением, согласно результатам наших исследований, полиморфизм C-174G генаIL-6 не проявил своей значимости. Данный полиморфизм гена IL-6 не проявил себя как ген-кандидат, повышающий риск развития такого акушерского осложнения, как ПРК. Результаты проведенных нами исследований мотивируют к дальнейшему изучению генетических полиморфизмов с целью прогнозирования риска развития послеродового кровотечения у женщин узбекской этнической принадлежности и разработки соответствующих профилактических стратегий для уменьшения материнской смертности и заболеваемости.

Следует подчеркнуть значимость отдельных генотипов выбранных полиморфизмов генов цитокинов, учитывая их важную роль в различных биологических процессах организма. Тем не менее, возникает ряд вопросов, требующих дальнейшего углубленного рассмотрения. Настоящее исследование призвано способствовать вдохновению научного сообщества на продолжение изучения в данной области, что может иметь существенное клиническое значение для диагностики и профилактики акушерско-гинекологических патологий.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Amatya N., ChIL-ds E.E., Cruz J.A., et al. // Arid. Sci. Signal. – 2018. – Vol.11. – eaat4617.

2. Bateman B.T., Berman M.F., RIL-ey L.E., Leffert L.R. // Anesth Analg. – 2010. – Vol.110. – P.1368–1373.

3. Blackwell S., Romero R., Chaiworapongsa T., et al. // J Matern Fetal Neonatal Med. – 2003. – Vol.14. – P.151–157.

4. Cухих Г.Т., Ванько Л.В. // Акушерство и гинекология. – 2012. – №1. – С.128–136.

5. Dinarello C.A. // Eur. J. Immunol. – 2007. – Vol.37 (Suppl.1). – S34–S45.

6. Fishman D., Faulds G., Jeffery R., et al. // J Clin Invest. – 1998. – Vol.102. – P.1369–1376.

7. Girard T., Mörtl M., Schlembach D. // Curr Opin Anaesthesiol. – 2014. – Vol.27. – P.267–274.

8. Huber A., et al. // J Soc Gynecol Investig. – 2005. – Vol.12, N1. – P.33–36.

9. Hulkkonen J., VIL-po J., VIL-po L., Koski T., Hurme M. // Haematologica. – 2000. – Vol.85. – P.600–606.

10. Jones S.A., Horiuchi S., Topley N., et al. // FASEB J. – 2001. – Vol.15. – P.43–58.

11. Jostock T., Mullberg J., Ozbek S., et al. // Eur J Biochem. – 2001. – Vol.268. – P.160–167.

12. Kang, et al. // J. Exp. Med. – 2020. – Vol.217, N5. – e20190347.

13. Kang S., Tanaka T., Narazaki M., Kishimoto T. // Immunity. – 2019. – Vol.50. – P.1007–1023.

14. McEvoy A., Sabir S. Physiology, Pregnancy Contractions. 2022 Sep 19. In: StatPearls [Internet]. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing; 2023 Jan. – PMID: 30422522.

15. Meher S. // Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. – 2019. – Vol.61. – P.41–54.

16. Narazaki M., Kishimoto T. // Int. J. Mol. Sci. – 2018. – Vol.19. – P.3528.

17. Oyelese Y., Scorza W.E., Mastrolia R., Smulian J.C. // Obstet Gynecol Clin North Am. – 2007. – Vol.34. – P.421–441.

18. Simbircev A.S. // Medicinskiy akademicheskiy jurnal. – 2013. – Vol.13, N3. – P.18–41.

19. Sosa C.G., Althabe F., Belizán J.M., Buekens P. // Obstet Gynecol. – 2009. – Vol.113. – P.1313–1319.

20. Zenclussen A.C., Kortebani G., Mazzolli A., Margni R., Malan B.I. // Am J Reprod Immunol. – 2000. – Vol.44. – P.22–29.

Медицинские новости. – 2024. – №4. – С. 66-69.

Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.